大肠杆菌发酵

chuxiaohu2008 · 发表于 2013-8-9 21:19:48

大肠杆菌发酵表达蛋白多少的标准是什么？100L发酵了将近300个批次，发酵过程都很稳定，从最终产品产量的表现看，仅靠电泳完全反应不出来。（有的电泳表达率高反而产量低）求教还有什么方法可以体现发酵蛋白表达的效果？多多益善

宋志法 · 发表于 2013-8-12 13:43:14

呵呵···这个首先要保证批次之间发酵过程中各数据偏差不大，比如：接种时OD、过程中pH变化（消耗氨水量）、每阶段溶氧变化及转速调整等、诱导表达时间及OD、结束收获湿菌体量等，其次才是发酵结束后检定的数据，包括电泳、蛋量及目的蛋白的凝胶成像分析等，最后就是纯化后的目的蛋白量及通过液相检测的数据进行分析了，所以这些前提是要保证发酵从头到尾各个数据控制偏差保持一致，检定方法统一等。
这样简单介绍下，希望能帮到你所说的问题。

chuxiaohu2008 · 发表于 2013-8-12 19:04:39

感谢你您的回复；你所说的都是我们生产中已经得到关注的重要参数，但是我觉得这些还不够，还是不能体现发酵水平的好坏。

190227240 · 发表于 2016-4-15 21:13:35

你们做不做蛋白浓度检测？我们感觉也有这个问题，产量和检测结果没有规律！你们发酵过程有染菌的时候么？

shine372 · 发表于 2016-4-26 13:19:26

最好的方法是检测活性，不过你的包涵体不好测啊

桑园 · 发表于 2017-3-20 10:25:24

数据统计分析就够了，也就电泳粗侧一下，其他没有太好的手段

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