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[求助] 菌体下罐后,在空气中,几分钟就自己裂解了

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发表于 2016-1-5 14:03:14 | 显示全部楼层 |阅读模式
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论坛sczl1379:
请教一下各位老师,菌体下罐后,在空气中,几分钟就自己裂解了,是怎么回事儿?
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  • TA的每日心情
    慵懒
    2019-9-11 11:08
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    [LV.2]偶尔看看I

    发表于 2016-1-5 14:05:57 | 显示全部楼层
    论坛求真VS务实:
    1、杂菌污染.这种情况一般可能性最大,可能在你前面的步骤中引入杂菌,后面扩大培养时杂菌达到一定数量,耗氧和耗养增加.解决办法:用具杀菌.
    2、发酵罐条件设置不适合.这种情况比较常出现在新手中,查看你的各条件设置,查看发酵罐使用过程中各条件变化.
    3、噬菌体污染.这是一种非常恶心的一种状况,到不是说难解决,高温下就可以,但是噬菌体污染源一定要找到,不然这种情况会时有发生.
    4、毒性蛋白表达.这种情况很少出现,就是你转化进去的质粒有毒性蛋白的表达,这样就会出现不能大量培养,长到一定程度就会自溶.
    5、还有一种很无奈的状况,大肠杆菌培养到一定程度就会有一些会自然衰老死亡(可能是连续扩培时培养基没有彻底更换导致),这些死亡的菌体裂解释放出裂解酶,致使越来越多菌体被溶解,释放出更多裂解酶,恶性循环下,菌体绝大部分死亡.
    当然,肯定还有其他可能,我只能提供些参考,还需要你自己做一些测试.如果你们解决了问题,希望能告诉我一下,
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    该用户从未签到

     楼主| 发表于 2016-1-5 14:16:18 | 显示全部楼层
    论坛sczl1379
    关键是,我的菌在罐子里面是没问题的,取样镜检 ,形态也是正常的。
    但就是在下罐后,几分钟的时间,就裂解了。还没来得及离心。
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    该用户从未签到

    发表于 2016-1-5 14:42:47 | 显示全部楼层
    论坛yxylmr:
    你怎么知道菌体裂解了
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    该用户从未签到

     楼主| 发表于 2016-1-5 14:43:07 | 显示全部楼层
    论坛sczl1379
    因为发酵液突然变得很粘稠,类似于很浓很浓的鼻涕那种粘稠,然后离心,取上清去跑电泳,我们的目标蛋白条带出来了,而且条带还比较宽。
    我的目标蛋白本来是在细胞内的,但是现在已经出现在了发酵液中。
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    发表于 2016-2-23 16:25:26 | 显示全部楼层
    算常见,需要彻底解决!
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    发表于 2016-4-26 13:22:01 | 显示全部楼层
    在摇瓶上发酵时都没有出现过这些问题么?
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    发表于 2017-4-18 12:50:56 | 显示全部楼层
    有可能发酵液盐浓度太低
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