TA的每日心情 | 开心 2018-3-3 10:24 |
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发酵生产中影响产酶量和活力的因素# k0 N# m5 Z, |& \
影响纤维素酶产量和活力的因素很多,除菌种外,还有培养温度、pH、水分、基质、培养时间等。这些因素不是孤立的,而是相互联系的。
0 n0 r8 u! v+ _' l纤维素酶菌种易退化,退化后其产酶力明显降低,其原因可能有三个方面:" u8 U& p6 F7 c# q/ ~" w" S
1、经诱变筛选的菌种发生回复突变。
% ~9 J( o, S9 u1 L( d2、自然负突变。
6 v4 i: C3 \. y3 |3、菌种长时间低温斜面保藏,会在分生孢子上长出次生菌丝,而次生菌丝所形成的分生孢子生命力弱,这可能是菌种退化的主要原因。" s% u4 `9 O; o# Q6 b9 p% a
纤维素酶的最适pH一般在4.5~6.5。葡萄糖酸内酯能有效的抑制纤维素酶,重金属离子如铜和汞离子,也能抑制纤维素酶,但是半胱氨酸能消除它们的抑制作用,甚至进一步激活纤维素酶。植物组织中含有天然的纤维素酶抑制剂即酚类化合物;它能保护植物免遭霉菌的腐烂作用。如果植物组织中存在着高的氧化酶活力,那么它能将酚类化合物氧化成醌类化合物,后者能抑制纤维素酶[1] 。
( P# ^( x3 v& j: _二、纤维素酶在应用的影响因素
b3 k5 K, M6 p2 x P* a1 L! `+ ?' H1、纤维素酶的固定化( Z: S% e! p/ {4 l# h9 H
纤维素酶本身是一种蛋白质,本身非常不稳定,结构容易破坏,用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在其中,使得酶在水中溶性凝胶或半透膜的微囊体从而导致流动性降低,提高酶的稳定性,从而提高酶的作用效率。
' ]* j* [1 o4 L4 V2纤维素酶作用环境的pH
7 z9 W( [( Z6 q纤维素酶由于其本身是蛋白质的特性,如果在过酸或过碱的环境下其自身结构非常容易被破坏,因此在使用过程中一定要在合适的ph环境下(一般是pH3-6),这样才能使纤维素酶发挥最大的作用。
8 [$ j7 a! a0 R5 ~! y' J3、纤维素酶作用环境的温度
' k0 j6 g6 Z! G1 h纤维素酶在作用过程中受温度影响也是非常大的,温度对酶促反应速度的影响有两个方面:一方面是在一定范围内当温度升高时,反应速度就加快;另一方面,随温度升高而使酶蛋白逐渐变性,超过一定范围,反应速度反而降低,最终导致纤维素酶失活,因此在使用纤维素酶的过程中一定要注意控制好反应温度。) d- P. M" a1 i P/ B
4、纤维素酶在作用环境中的浓度
0 B! o; M- R7 a. o7 B5 Q' d, k纤维素酶的酶促反应就和化学反应的道理是一样的,刚开始随着作用环境中纤维素酶的浓度增加,反应速度会逐渐增快,然而纤维素酶在反应过程中要先和第五形成中间复合物,进一步反应,因此随着纤维素酶的增加,纤维素酶和底物的接触面积就会逐渐降低,这就导致纤维素酶不能顺利发挥作用,因此反应环境中如果添加过多的纤维酶,会抑制纤维素酶自身的催化效率。
: ?3 [) x6 G0 n8 J6 y" Q5、糖类对纤维素酶可以起到保护的作用
* D" Z! v8 q/ y在室温下,蔗糖,葡萄糖,麦芽糖、海藻糖等糖类物质可以可以对纤维素酶起到保护的作用。添加保护剂的方法是最简便易行的酶稳定化方法 ,但在高温下会加速酶的失活。在室温下葡聚糖对纤维素酶没有保护作用,但在高温下对酶有明显的保护作用 。
. w' |1 s3 `3 d( @8 ?6、抑制剂和激活剂对纤维素酶的影响- ?5 ~: q7 H( F5 Y0 Z5 w
纤维素酶属于蛋白质,其本身是具有活性的,因此,一些重金属离子,微量元素等物质会对纤维素酶活性起到抑制作用,相反一些钠离子等会提高纤维素酶的活性,因此在纤维素酶使用过程中要注意起作用环境中抑制剂或者激活剂的存在。! U: q' s8 Q8 `. d+ R+ k' [* g
总之,纤维素酶的作用不仅仅是收到纤维素酶菌种和自身品质的影响,还受到作用环境的影响,因此纤维素酶在工业生产过程中,好的生产工艺,好的使用方法,甚至会比纤维素酶自身的质量还要重要!
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