lb75618 发表于 2018-9-6 17:32:33

在不加抗生素的情况下培养，质粒丢失的很厉害，请问有没有好的方法解决？

论坛lb75618：各位老师好，我在做大肠工程菌培养的时候，在不加抗生素的情况下培养，质粒丢失的很厉害，请问有没有好的方法解决？谢谢（注：不能加抗生素）

lwdfjw 发表于 2018-9-6 22:18:31

叶知秋老师：

质粒是菌种保存中丢失的还是发酵中丢失的？

有的质粒属于温度敏感性质粒，如农杆菌质粒，当温度超过30℃时，就可引起质粒的丢失。对于温控表达系统，温度的影响也尤为重要，必须要使用合适的温度在合适的时机诱导表达，否则会影响质粒的稳定性。一般情况下，低的培养温度有利于保持质粒的稳定性。

溶氧：在使用机械搅拌式发酵罐对基因工程菌进行培养时，质粒的稳定性通常要比在摇瓶中培养时低，这是因为在发酵罐中搅拌能够增加溶氧浓度，搅拌强度会影响质粒丢失速率。

leichen2018 发表于 2018-9-6 22:23:16

论坛leichen2018： 降低表达速度，
可以考虑整合到基因组里，加少量葡萄糖也能减少质粒丢失

qiu200291 发表于 2018-11-1 13:53:58

适当控制菌体生长速度，可以有效较少质粒丢失的状况出现
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