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[求助] 在不加抗生素的情况下培养,质粒丢失的很厉害,请问有没有好的方法解决?

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发表于 2018-9-6 17:32:33 | 显示全部楼层 |阅读模式
M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
论坛lb75618:各位老师好,我在做大肠工程菌培养的时候,在不加抗生素的情况下培养,质粒丢失的很厉害,请问有没有好的方法解决?谢谢(注:不能加抗生素)
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  • TA的每日心情
    奋斗
    6 小时前
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    [LV.Master]伴坛终老

    发表于 2018-9-6 22:18:31 | 显示全部楼层
    叶知秋老师:

    质粒是菌种保存中丢失的还是发酵中丢失的?

    有的质粒属于温度敏感性质粒,如农杆菌质粒,当温度超过30℃时,就可引起质粒的丢失。对于温控表达系统,温度的影响也尤为重要,必须要使用合适的温度在合适的时机诱导表达,否则会影响质粒的稳定性。一般情况下,低的培养温度有利于保持质粒的稳定性。

    溶氧:在使用机械搅拌式发酵罐对基因工程菌进行培养时,质粒的稳定性通常要比在摇瓶中培养时低,这是因为在发酵罐中搅拌能够增加溶氧浓度,搅拌强度会影响质粒丢失速率。

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  • TA的每日心情
    奋斗
    2021-12-6 14:34
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    [LV.4]偶尔看看III

    发表于 2018-9-6 22:23:16 | 显示全部楼层
    论坛leichen2018: 降低表达速度,
    可以考虑整合到基因组里,加少量葡萄糖也能减少质粒丢失
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  • TA的每日心情
    擦汗
    2019-3-25 13:41
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    [LV.5]常住居民I

    发表于 2018-11-1 13:53:58 | 显示全部楼层
    适当控制菌体生长速度,可以有效较少质粒丢失的状况出现

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