关于毕赤酵母发酵后期甲醇诱导表达蛋白发酵液产生黄绿色的原因
本帖最后由 70417859 于 2010-7-29 16:20 编辑发酵同盟上海群 - 融化冰雪(252119642)
关于毕赤酵母发酵后期甲醇诱导表达蛋白发酵液产生黄绿色的原因
大家有座毕赤酵母发酵蛋白的吗,是甲醇诱导表达蛋白,到后期发酵液成绿色,这是什么原因啊,前期没有,希望高人指点
PTM每天加 1mL/L/天 我师弟是做毕氏酵母甲醇诱导表达干扰素的
他们的发酵液也是黄绿色的
而且把菌体分离之后的发酵液清夜也是黄绿色
根据经验这种颜色越明显蛋白产量越大
我们分析可能是蛋白的颜色或者是微量元素的颜色
希望有参考价值 你好:我想你赤酵母发酵表达的是什么蛋白?周期是多少?表达量是多少?培养基氮原主要用什么原料?这些都有关系的,你说说大家才可以帮你分析。 是微量盐的原因吧 微量盐和色素蛋白的原因,与信号肽有关,经验是颜色越绿蛋白表达越高,但是否是目标蛋白很难说,存在糖基化和蛋白酶切位点的可能性 本帖最后由 hyaline 于 2013-4-26 11:32 编辑
PTM當中所含的鐵離子、銅離子於不同的pH值與陰離子根所呈現的顏色;另外是菌體分泌的包外多糖也偏綠。樓上所說的與蛋白質產量相關的觀察,很有趣 :o
;Pinvitrogen 某一版的指導中有說明。 (转)毕赤酵母发酵过程中产生的色素主要是绿色的,只要用甲醇启动子的都会产生,它是醇氧化酶(Aox1p).引起的,该酶在高密度发酵过程中会形成同源八聚体与FAD结合,形成发色基团。只有甲醇诱导后才会产生,诱导之前不会出现,它并不是分泌酶,是到了发酵后期,随着细胞的裂解释放到培养基中的,到了发酵后期,它能占到菌体总蛋白的30%左右,所以培养基颜色很绿。通过这个也可以大体判定诱导的程度。
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