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[求助] 种子罐、发酵罐

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发表于 2012-12-18 22:03:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
高级求助
产品: 生物肥料
菌种: 枯草芽孢杆菌
阶段: 种子罐,发酵罐大生产
染菌情况:
镜检结果: 菌浓高,芽孢率80%以上
问题描述: 种子罐、发酵罐发酵结束后,镜检菌浓很高,但是计数不到一亿
可排除因素: 菌种退化,发酵培养基,排除图板操作技术
枯草芽孢杆菌,大生产上发酵罐芽孢率90%以上、50%芽孢脱落停罐,计数可达到400-500亿。从今年九月份开始,镜检菌浓依旧很高,但计数逐渐降低,11月份开始计数不足一亿。做过噬菌斑检测,发现有噬菌斑后甲醛熏蒸。之后的几次上罐有时会有噬菌体有时没有,但计数依然是这样的结果。请教各位老师镜检浓度高,计数结果低是什么原因
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该用户从未签到

发表于 2012-12-22 20:38:19 | 显示全部楼层
镜检浓度高?这跟你制片的方法有关,最好不要做为菌浓评定标准,既然噬菌体没有间断,建议停产一段时间仔细按照噬菌体处理方法去做一遍

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 楼主| 发表于 2013-7-1 10:10:04 | 显示全部楼层
我现在工作是芽孢菌的生产发酵。最近生产上有一个问题,芽孢菌发酵过程中检测正常,镜检菌浓很高,按照以前的经验应该有500亿/ml,对数期后pH逐渐上升,芽孢率80%左右放罐,但是梯度计数结果很低,只有十几亿。可以排除噬菌体污染。几株菌都发生了这种情况,实验室环境下正常,上罐就会有这种异常。我现在怀疑芽孢有残缺,不能正常萌发
问题补充:可排除的问题1 镜检技术:相同的人,同样的操作,出入不会很大。2 实验室摇瓶的结果没有出现这样的情况:实验室镜检菌浓一般时就可以达到一百亿左右。3放罐之后检测无噬菌斑。4 排除菌种退化,以前生产的菌种和新筛选的菌种第一次上罐都发生了这样的情况。

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发表于 2013-7-1 10:50:34 | 显示全部楼层
假定如楼主所说根据经验菌浓、镜检均正常。只是计数出现背离经验的异常。可以考虑1、计数所用培养基是否更换了供应商或生产批次,是否合格?培养设备、环境、方法等有无变化和异常。2、可虑菌种本身原因或发酵工艺等方面。

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发表于 2013-7-8 17:19:42 | 显示全部楼层
做芽孢的好像很多啊。
不过不少人都抱怨说产量不高,不知道为什么。
也许是菌种不好?
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    [LV.4]偶尔看看III

    发表于 2014-4-5 20:14:58 | 显示全部楼层
    是否放罐早了
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    发表于 2014-4-19 14:24:44 | 显示全部楼层
    种子和配方都有问题,菌数低是个普遍的现象,需要不断的优化和改进
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    该用户从未签到

    发表于 2014-4-19 14:25:31 | 显示全部楼层
    我们已经由原先的十几亿目前已经优化到80亿了

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