移液器的种类和使用

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移液器的种类和使用
" Y5 x( e( y2 y, _) ^% F准确的分析方法对于生物化学实验是极为重要的，在各种生物化学分析技术中，首先要熟练掌握的就是准确的移液技术。为此要用到各种形式的移液管，其中有一些是学生们在化学实验中未用过而在生化实验中是常用的。
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; K. B0 o" T8 W3 l1 滴管
( [6 q2 c, M1 O' ~使用方便，可用于半定量移液，其移液量为1mL～5mL，常用2mL，可换不同大小的滴头。滴管有长、短两种，新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管，可以比普通滴管更准确地移液，并防止液体吸入滴头。

2 移液管(吸管)
# T$ [) n3 \8 y% g- c+ B吸管使用前应洗至内壁不挂水珠，1mL 以上的吸管用吸管专用刷刷洗，0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡，必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌，应尽量避免使用。若有大量成批的吸管洗后冲洗，可使用冲洗桶，将吸管尖端向上置于桶内，用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗。
4 W( B) M) y+ g* ^& ?$ W8 U0 f% t吸管分为两种，一种是无分度的，称为大肚吸管，精确度较高，其相对误差A 级为0.7％~0.8％，B 级为1.5％~0.16％，液体自标线流至口端(留有残液)，A 级等待15s，B 级等待3s。另一种吸管为分度吸管，管身为一粗细均匀的玻璃管，上面均匀刻有表示容积的分度线，其准确度低于胖肚吸管，相对误差A 级为0.8％～0.2％，B 级为1.6％～0.4％，A 级、B 级在吸管身上有A、B 字样，有”快”字则为快流式，有”吹”字则为吹出式，无”吹”字的吸管不可将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要用吸水纸擦拭管尖。  

/ W* ^6 f8 n# q) S* R3 J3 微量进样器
+ q+ ^, f  g; |: @3 z- w微量进样器常用作气相和液相色谱仪的进样器，在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器，通
常可分为无存液和有存液两种。.  
(1)10μL 以下的极微量液体进样。
无存液微量进样器：进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处，不会出现存液。
(2)10μL～100μL 有存液微量进样器：不锈钢的针尖管部分是空管，进样器的柱塞不能到达，因而管内会存有空气或液体，其使用注意事项是：①不可吸取浓碱溶液，以免腐蚀玻璃和不锈钢零件；②因为有存液，所以吸液时要来回多拉几次，将针尖管内的气泡全部排尽；③针尖管内孔极小，使用后尤其是吸取过蛋白质溶液后，必须立即清洗针尖管，防止堵塞。若遇针尖管堵塞，不可用火烧，只能用φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通；④进样器未润湿时不可来回干拉芯子，以免磨损而漏气；⑤若进样器内发黑，有不锈钢氧化物，可用芯子蘸少量肥皂水，来回拉几次即可除之。

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4 自动取液器
这种取液器在生化实验中大量地使用，它们主要用于多次重复的快速定量移液，可以只用一只手操作，十分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5％～1.5％)，移液的精密度(即重复性误差)更小些，为≤0.5％。
( p% J3 f% n" n取液器可分为二种：一种是固定容量的，常用的有100μ L 等多种规格。每种取液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头，吸头通常是一次性使用，当然也可以超声清洗后重复使用，而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌；另一种是可调容量的取液器，常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等几种。
8 y4 |# H* v9 X' P, v3 O; ~可调式自动取液器的操作方法是用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，使数字窗口出现所需容量体积的数字，在取液器下端插上一个塑料吸头，并旋紧以保证气密，然后四指并拢握住取液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，将取液器的吸头插入待取的溶液中，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间)，将吸头沿器壁滑出容器，用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体，排液时吸头接触倾斜的器壁，先将按钮按到第一停点，停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间)，再按压到第二停点，吹出吸头尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸头，可按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸。
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3 C$ y! P; q0 J9 F/ J0 n2 Q& v自动取液器的使用注意事项是：
. H' B: M! V# {7 i% W( L①吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
* j/ ^- ]- y, @" H②为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。
③浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
( F+ i! s8 {9 |5 f" L4 e④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
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可调式自动取液器的操作方法:
+ z! ~* B1 e  W5 r/ J用拇指和食指旋转取液器上部的旋钮，使数字窗口出现所需容量体积的数字，在取液器下端插上一个塑料吸头，并旋紧以保证气密，然后四指并拢握住取液器上部，用拇指按住柱塞杆顶端的按钮，向下按到第一停点，将取液器的吸头插入待取的溶液中，缓慢松开按钮，吸上液体，并停留1～2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间)，将吸头沿器壁滑出容器，用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体，排液时吸头接触倾斜的器壁，先将按钮按到第一停点，停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间)，再按压到第二停点，吹出吸头尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸头，可按下除吸头推杆，将吸头推入废物缸
移液器使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
4 p. q2 f* ]( |' |3 F0 _, W* l(2)为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g.
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的，长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
  W; z7 d( @. f(6)移液器未装吸头时，切莫移液。
- n$ e" k' K! R所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器。数字清清楚楚在显示窗中，旋转到所需量程(7)在设置量程时，请注意
+ }- U. e* K' Z' }4 Q(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。
! t) b" e8 i. d$ G+ `, R/ w8 _(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
# B/ i6 \: s* h# f# B# e(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作

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量程的调节
　　在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
+ t6 S- r1 P  \　　在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
　　枪头（吸液嘴）的装配
　　在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
　　移液的方法
　　移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。
: U( H' ?1 j0 x2 ~# @8 W+ `　　一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
　　二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。
) o& r7 S- I( l+ q1 ~8 k　　移液器的正确放置
　　使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

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移液器（移液枪）的使用与维护方法
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在进行分析测试方面的研究时，一般采用移液枪（pipette）量取少量或微量的液体。对于移液枪的正确使用方法及其一些细节操作，是很多人都会忽略的。现在分几个方面详细叙述。
2 d% ~# L) p& V5 z1 J9 c  _量程的调节
    在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。
2 P. v; q2 p* f$ `在该过程中，千万不要将按钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液枪。
枪头（吸液嘴）的装配
5 F' w) D+ P  u, o7 s6 Q   在将枪头（pipette tips）套上移液枪时，很多人会使劲地在枪头盒子上敲几下，这时错误的做法，因为这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住。正确的方法是将移液枪（器）垂直插入枪头中，稍微用力左右微微转动即可使其紧密结合。如果是多道（如8道或12道）移液枪，则可以将移液枪的第一道对准第一个枪头，然后倾斜地插入，往前后方向摇动即可卡紧。枪头卡紧的标志是略为超过O型环，并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法
9 y! S6 C# V7 O. c; x8 f    移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2－3毫米。在吸液之前，可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。这时可以采取两种移液方法。
: o3 t' X1 u0 E' u/ Y一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。最后松开按钮。
7 ~# e6 y4 m3 i3 h6 }  H4 d( H, q二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体，其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至第一停点排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。
移液器的正确放置
使用完毕，可以将其竖直挂在移液枪架上，但要小心别掉下来。当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。
. P* T* t5 G5 \% x: I维护保养时的注意事项
1 G9 t- Y) E; m0 Z        如不使用，要把移液枪的量程调至最大值的刻度，使弹簧处于松弛状态以保护弹簧。
+ M, o0 q) {9 K% V) ?        最好定期清洗移液枪，可以用肥皂水或60 ％的异丙醇，再用蒸馏水清洗，自然晾干。
        高温消毒之前，要确保移液器能适应高温。
        校准是可以在20-25度环境中，通过重复几次秤量蒸馏水的方法来进行。
        使用时要检查是否有漏液现象。方法时吸取液体后悬空垂直放置几秒中，看看液面是否下降。
        如果漏液，原因大致有一下几方面：
& N+ g: Q. U& \1、枪头是否匹配；
2、弹簧活塞是否正常；
/ x8 \& K2 G# k" o3、如果是易挥发的液体（许多有机溶剂都如此），则可能是饱和蒸汽压的问题。可以先吸放几次液体，然后再移液。