结晶紫染色的问题

20091018涵

我现在有几个问题想问，近期做发酵罐的空培实验，空消后实消，降温，然后取消后样，做镜检。每一次镜检的时候都会有染色很深的杆菌，我想问一下，用结晶紫染色液染色观察到的染色深的是不是一定是活菌。另外，还有一个问题，在镜检的时候能看到杆菌，按常理说就是染菌了，但是我取部分发酵液做平板培养，平板上一个也没长，这点很是困惑。我希望专业人士能够解答，赐教。非常感谢

gl19860312

生产上 好像头十几个小时 就是这种情况
菌丝还没有成型吧
搅拌、空气流量的影响 造成染色的片子上菌体是断裂的
分散的

20091018涵

gl19860312 发表于 2012-9-22 16:11
生产上 好像头十几个小时 就是这种情况
菌丝还没有成型吧
搅拌、空气流量的影响 造成染色的片子上菌体是断 ...

你回答的好像不是我问的哦，我做的是空培啊，怎么会有菌，有已经杀死的死菌是对的，但是偏偏用结晶紫染色（简单染色），镜检后有染色很深的杆菌，想问一下是死菌还是活菌

gl19860312

20091018涵 发表于 2012-9-22 16:31
你回答的好像不是我问的哦，我做的是空培啊，怎么会有菌，有已经杀死的死菌是对的，但是偏偏用结晶紫染色 ...

是死菌吧

bramble

会不会是消后培养基中含的杂质，像我们对实消后未接种的培养基进行镜检就会看到一些杆菌，不过染色不算深也不算浅，老师傅们都说是玉米浆里带的，另外，还想问问，是否染色浅的就是死菌，染色深的就是活菌呢？

boboheao

死菌，染色深浅也和菌检的做法相关！不一定染色深才是活菌！

基因

在这我也有个问题想问就是：75L种子罐在转完种后，加纯化水水进行空消，空消完毕后我进行镜检发现不了有完整的菌体，都是些菌体碎片；但1吨发酵罐在培养基灭完菌后立即镜检就能发现有完整的工程菌，我想问的就是这存在的杆菌是怎么回事，由种子罐的例子推测应该不是死的吧；是培养基没有灭透吗，不过即便是转上种培养的话也能完成发酵培养，所以这件事我一直没有搞明白，还希望大家帮分析分析~

gx0406

赞成5楼说法，我们也经常遇到

a89440104

为什么不换换染色方法呢，比如美蓝染色？

justinzhou

空培后染菌有菌，可能是：
1、罐内及培养基中有菌（像很多复合培养基中都有杆菌），灭菌后培养镜可能看到是死菌体；
2、也有可能你看到的是培养基中的杂质。
所以你说镜检看到有菌体再涂平板就没有菌生长了，因为那里面是死菌体，所以不生长。

另你可能换一种染色方法，我们用的染色法就能区分死菌和活菌。这样就好分析了。