大肠杆菌包涵体洗涤方法

s443201191 · 发表于 2012-12-14 17:20:22

大肠杆菌离心后的包涵体洗涤方法。一般有什么好方法啊。从菌体破碎到得到纯的包涵体过程？本人新手没做过这块的，请教做过的同行提供点详细方法。

s443201191 · 发表于 2012-12-17 14:35:05

没有人做过？？

gx0406 · 发表于 2012-12-31 08:37:52

这种问题建议到小木虫求助

宋志法 · 发表于 2013-3-13 14:40:28

大致可以分为：破碎、洗涤两大步，最近我也在做这方面摸索，有机会可以探讨下QQ2514269206

NTMD2013 · 发表于 2013-7-16 20:41:19

通常做法是离心后用EDTA和Tris重悬后均质，再用EDTA和Tris溶液洗涤离心。均质重悬溶液中可加入0.1%－033%曲拉通

chuxiaohu2008 · 发表于 2013-7-20 08:59:27

一般包涵体处理：菌体浓缩（有条件的话可以用NaCl维持一定的渗透压进行洗涤）→定容后维持一定的pH、一定终浓度的NaCl和EDTA（NaCl一般为50mmol/l,EDTA一般为10mmol/l）高压匀浆破菌两次→离心2次（为了使包涵体中的杂质更少你可以在第一次离心后将包涵体再进行高压匀浆打匀后进行第二次离心）:离心1 维持一定的pH、一定终浓度的NaCl和EDTA

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