[转帖]菌种数据资料库

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菌种数据资料库1

菌种：黑曲霉（Aspergillus niger Van Tieghem）
菌种信息来源：云南燃料二厂
用途：柠檬酸发酵生产
, @/ a+ M. I9 d. o  F培养基：木薯淀粉培养基（生产用）
发酵方式：大型发酵罐（75T-100T）好氧发酵
发酵水平：摇瓶 12-13%；发酵生产 8-10%
重要的提取方式：加弱碱（碳酸钙）中和再水解
研究状况：工业化生产，总产量高于国外但成本有待降低
其它：

+ r6 y$ L3 i( E-----------------------------------------

, w+ x1 W8 f, Y3 b5 W菌种：土曲霉 Aspergillus terreusAs
/ U4 }( K3 w4 T- }菌种信息来源：云南燃料二厂
用途：衣康酸发酵生产
/ f1 y7 [0 g6 b培养基：蔗糖为主的培养基（生产用）
发酵方式：大型发酵罐（300T）气升式好氧发酵
- f# f: X6 y* s发酵水平：摇瓶 6-8%；发酵生产 5-6%
重要的提取方式：重结晶和离子交换提取
研究状况：工业化生产，产酸水平有待进一步提高和稳定
- \9 X: M! l/ V7 L" ]( A0 T其它：衣康酸最初在云南工业化生产，但后来由于各种原因生产状况不佳；
9 ~& A7 Z7 I8 u% q, o  B, x
-----------------------------------------

; K7 |; B& b, t" A4 w8 s( C菌种：地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)
6 v. u5 v: }0 X菌种信息来源：本实验室在屠宰场的污水和土壤中筛选得到
用途：纤溶酶发酵生产
培养基：以蔗糖和玉米粉为主要碳源，以酵母膏为主要氮源。添加适当无机盐（研究用）
$ N7 w) @: x" H$ ?9 b5 V; z% O发酵方式：摇瓶好氧发酵
9 k8 [) s# ]! L9 x发酵水平：摇瓶800～1000U/mL
重要的提取方式：提取路线与一般酶提取相同
研究状况：正在进行纤溶药物的研发前期工作

- c5 P: p4 N' t$ h# W  [-----------------------------------------
! R( x" G0 @2 V# L. G" l$ D& h2 z
% @4 w* N/ ^2 {% t7 \# ]& d$ r. Q菌种：恶臭假单胞菌(Pseudomonas putita)
菌种信息来源：本实验室在石化厂的回流淤泥样中筛选得到
用途：降解芳香族化合物
培养基：NMS Medium（一种无机盐培养基,研究用）
发酵方式：摇瓶好氧发酵
2 u; t1 R& O* ?发酵水平：摇瓶800～1000U/mL
; X9 H/ V8 Q. x  m6 H$ u研究状况：实际运用中,结果还没出
/ g- E3 K; k) D; m
$ j- [0 X' x) ?/ {-----------------------------------------
. A! q& o* Y7 s: P3 i$ i
3 @. D6 I( C1 p& F* F7 N菌种：米曲霉305、
菌种信息来源：本实验室在酿造厂筛选
用途：纤维素酶发酵生产
培养基：以蔗糖和玉米粉为主要碳源，添加适当无机盐（研究用）
发酵方式：摇瓶好氧发酵
' h+ o6 {6 o4 F3 J  G5 c发酵水平：摇瓶400～800U/mL
/ v6 J; g) M* x8 f; Y0 J( t重要的提取方式：提取路线与一般酶提取相同
研究状况：正在进行研发前期工作

-----------------------------------------
+ o  W- R2 A( J( e% z
1 K/ f1 o0 t% j8 W菌种：金针菇
% ~# G( ^$ ?5 {; |菌种信息来源：本实验室保存
用途：产花生四烯酸
1 l9 T6 @* c+ Q9 w培养基：以葡萄糖和玉米粉为主要碳源。
发酵方式：摇瓶好氧发酵
发酵水平：0.6-1.1g/L
4 n; }3 C2 C4 H# |+ {( b) M5 d重要的提取方式:石油醚抽提
研究状况：正在进行研发前期工作
- r2 `& [+ P+ j  }. W; M  M
-----------------------------------------
" r1 |) c. C3 f  \0 I
4 O9 t+ a! B7 R8 ^0 aActinobacillus pleuropneumoniae（Shope ）Pohl et al
胸膜肺炎放线杆菌

" H/ w0 O* u: X% n. x259←青岛动检所，Shope。胸膜肺炎猪肺。生长要求NAD（辅酶Ⅰ）和5%～10%CO2环境，溶解绵羊红血球。
8 e9 R7 b% X, [/ e1 ]参考菌株，血清1型。血清定型。Path.Microbiol.，1968，31:215～225;Zentr.Bakeriol.，
" A8 _9 J" R5 u( B$ Z0 ~Iabt.，Orig.，1971，216:487～495;Int.J.Syst.Bact.，1978，28:20～26。培养基17，37℃。
) E" u8 Y% j" h4 G
-----------------------------------------

菌种： Actinobacillus pleuropneumoniae（Shope ）Pohl et al
# N  R/ i3 w, P胸膜肺炎放线杆菌
6 J. @; ]3 e$ p# x) `
8 y- i4 B2 v; |6 e/ N8 }& X来源：261←青岛动检所，S1421。猪关节炎脓肿。特性同 259株。参考菌株，血清3型。血清定型。
& }3 b  e6 H  U* P0 u2 W% H. j) k- n( mPath.Microbiol.，1968，31: 215～225;Zentr.Bakeriol.，Iabt，Orig.，1971，216:487～
495;Int.J.Syst.Bact.，28:20～26，1978。培养基17，37℃。
2 A! t0 T) O8 k2 x7 q
$ S/ j+ l# T3 V6 |6 y-----------------------------------------

名称：Acholeplasma laidlawii（Sabin） Edward and Freundt
* p0 Q3 M9 i0 |' p5 E& j莱氏无胆甾原体

  S9 D% l) V: O1 n: [- r# q/ T来源：365←丹麦国际支原体中心，PG8，ATCC 23206。鸡。
" G6 Y& O( z: a' j6 ?% n9 q能对绵羊和海猪血覆盖的琼脂区形成β-溶血。模式株。分离株血清定型。
Proc. Roy.Soc.London B，120:292～303，1936。培养基9，37℃。
( ^6 T  Y. W8 ^7 x) p4 U) }
( U5 `- q% u; C( G. r$ ~7 d* o-----------------------------------------

名称：Bacillus anthracis cohn
, A! M. n9 {% F0 u炭疽芽孢杆菌
/ f8 W" L) J0 Y5 G, {" S( |! f
来源：1←中监所，C40 208，马道（CGY）。
特性：弱毒株，无荚膜。普通肉汤培养物0.25ml皮下注射小白鼠、豚鼠，
小白鼠全部致死，半数致死豚鼠。培养基1，37℃。
本菌株为限制使用品种。
; F' v8 I$ v8 |* @  h8 g1 h" T
2007-7-18 21:21:22
5 l% Z, n* |1 v6 Z5 [/ T3 @# ilwangd
9 k- {$ m+ \6 k
; T5 X& h5 t. ?& X* L' v
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注册：2006年11月15日
7 |/ |% c3 u& d9 L; m第 2 楼   

--------------------------------------------------------------------------------

+ L, j$ m! b: I7 F1 C菌种数据资料库2(转载)

Egg drop syndrome virus
/ N& z- b' C: Q2 Y' i3 w. F7 j名称：产蛋下降综合征病毒

来源： AV70←中监所—ATCCVR921，K-11株。
制备材料:感染鸭胚液。
培养:37℃，5天。
8 d' X- ]! F) L& ?- i效应:无变化。冻
干保存于-70℃。
+ q* M+ Y. w* N/ k# H4 m! o宿主范围:鸭、鸭胚、鸭胚成纤维细胞、鸡胚肝细胞。参考文献: Avian Pathol.，
7:35～47，1978;Avian Dis.，26:354～359，1982。
特性:感染鸭胚的胚液，对鸡红细胞的凝集价达
+ ?. {9 x8 c  m6 H, u, K# \9 i7 K7 R; ?: T1:160000左右，致细胞病变，血凝抑制试验与腺病毒127株完全交叉反应。
用途:制备灭活疫苗及诊断制剂。
" _0 a, h" S; i2 G8 Y& V5 S- w
-----------------------------------------

Egg drop syndrome virus
- Y( {% S: r- q% l; E& |名称：产蛋下降综合征病毒
2 H% ^5 N" S; ]% c" b. m% R
来源：AV70←中监所—ATCCVR921，K-11株。
制备材料:感染鸭胚液。
培养:37℃，5天。效应:无变化。冻干保存于-70℃。
2 U" p2 E) o% N8 Q* b宿主范围:鸭、鸭胚、鸭胚成纤维细胞、鸡胚肝细胞。参考文献: Avian Pathol.，
7:35～47，1978;Avian Dis.，26:354～359，1982。
特性:感染鸭胚的胚液，对鸡红细胞的凝集价达
1:160000左右，致细胞病变，血凝抑制试验与腺病毒127株完全交叉反应。
用途:制备灭活疫苗及诊断制剂。

6 _% l4 k+ V1 Y( [, u-----------------------------------------

名称：Mycoplasma arginini Barile et al
( i. k( l3 b6 k# |& t2 e精氨酸支原体

& r" W0 L3 |" y$ e3 a2 t来源：346←丹麦国际支原体中心，G230。鼠。污染细胞后对细胞的生长有影响，通过生长抑制试验和免疫荧光能
用途：与其他支原体种区别。模式株。分离株血清定型。Proc. Soc.Exp.Boil. Med.，1968，129:489～
: I1 e' g9 J7 u& [) Y- s494。
1 G, }5 v  |: U培养基9，37℃。
1 p$ @# P6 I9 }6 W2 z5 N
-----------------------------------------
* Q8 ^+ v, F$ g; A) E" Q8 \
名称：Fowl adenovirus1
! Z: r7 N9 |6 [, g/ D鸡腺病毒1型

! B. z# o, x# k8 f来源：AV1←中监所←日本Ote14。原始分离:日本。
制备材料:鸡胚肾细胞或绒毛尿囊膜。
8 H, d5 N7 K, Q( N2 _; a" s* q& h* x培养:37℃，3～4天。
效应:致细胞病变，胚膜水肿。冻干保存于-70℃。
! R4 |* ]8 N  t! c宿主范围:鸡胚、鸡。
+ ^/ g( F; \6 ]特性:在同源细胞复制较好，在沉淀反应中与其他禽腺病毒有交叉反应。
# P9 x" A& ~5 h' i* Z( _* B# f用途:制备抗原。
% S* K$ H- N2 ~! m
4 T2 t$ R+ f4 S# F- e9 t-----------------------------------------

名称：Avian encephalomyelitis virus
禽脑脊髓炎病毒
6 T  l, u; S2 f6 k& L  q
8 r4 a4 q% q% K6 x2 G' ]/ d+ ^# @来源：AV36←中监所，C21-2-2，O20株。
7 L- I' X9 n( I  l制备材料:感染鸡胚脑组织乳剂。
9 Z' r, s% g- q: I8 r$ l- v9 a培养:37℃，9～13天。
0 f7 }3 u% j+ s效应:胎儿肌肉萎缩。冻干保存于-70℃。
宿主范围:鸡胚、鸡。
& S) @3 L( m5 {0 {( |0 s特性:接种雏鸡致病。
. `5 V8 Z* ]- q" K9 Z用途:研究用。
; l* G+ m$ P. G4 O# a
; b- m5 w7 ~! b-----------------------------------------
$ P; j0 {1 e. S( s6 A. n
& X! o6 M  S: J菌种：黄曲霉
菌种信息来源：本实验室筛选并保存
/ m; x* y0 S% y用途：生产稀有药用黄酮类物质
培养基：以麸皮为主要碳源，底物诱导。
/ p# f% m% C% q4 U( F+ P2 R2 y发酵方式：摇瓶好氧发酵
+ n, [* a/ ]: Q1 z3 _发酵水平：中试试验中
$ v) G$ ]7 s$ \+ M1 ^重要的提取方式:乙醇抽提
研究状况：已经申请专利，正在工业化转型
5 Z- P  m# t0 z0 }: O) {* o+ h
* N1 _- ^$ Q0 h+ U6 q-----------------------------------------

! |7 ]$ v9 r/ ]* q  H菌种：伤寒沙门氏菌Salmonella typhi（schroeter） Warren and Scott
% ?$ h5 c  {7 ?. n来源： 卫生部检定所，CMCC（B）50098，Ty-2。血清型:9，12，Vi∶d∶-。
: X2 I0 |, \5 I7 C) P用途：测定蛋白胨培养基的灵敏度———H2S生成、靛基质和糖发酵试验。
: f* F" C- Z  A
-----------------------------------------
: c# Y8 ~* H5 V: C
菌种：牛种布鲁氏菌 Brucella abortus（Schmidt） Meyer and Shaw
: e  R( t- o% u1 Z' [* L+ M; k1 |1 M( ~
  s/ Y+ L7 v; A( }来源：卫生部检定所（1982），CMCC（B）55223，45/20。
- {, [! g7 F" W; t1 m3 X特性：弱毒株，对人畜致病。作为牛的灭活疫苗生产菌株。

! ~1 v  E/ T! i9 Y本菌株为限制使用品种。
0 h4 a0 ~; Q& M) k# O9 u: W
-----------------------------------------
4 Z4 s' l1 o+ G! p" W7 `, q% b- L' t' u
菌种：厚孢轮枝菌（verticilliunm chlamydosporium）
菌种信息来源：本实验室筛选并保存
用途：重要的生防菌株（目前已用于植物病害线虫的防治）
培养基：PDA培养基
% J/ j3 n- v6 p$ a* z发酵方式：平板或摇瓶好氧培养
5 K2 |$ k: |# v1 z% \研究状况：已经申请专利，正在进行防效稳定性研究。

-----------------------------------------

' s" r  N; j7 o4 f3 W4 C5 ?菌种：钝齿棒杆菌（Corynebacterium crenatum）
菌种信息来源：本实验室筛选并保存
用途：精氨酸生产菌株 产酸能力达到4.0％
" U' f9 X0 t0 z培养基：葡萄糖－硫酸铵培养基
发酵方式：通风发酵罐
研究状况：中试（500L）


" l) T, ^* B, y4 Y& J: d+ f2007-7-18 21:22:57
lwangd
( [) p. \& U4 o
8 q$ ]1 [" I' P) I: {' L
5 }" V# N* [) A" _- M9 I; a' o7 q等级：版主
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! j: F; \, J3 l: V8 }注册：2006年11月15日
第 3 楼   
1 R: J- V: ^+ P2 g
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* x3 u3 S! e$ V4 a  A
菌种数据资料库3(转载)
* J8 v$ `( d$ J6 y
菌种：短小芽孢杆菌
信息来源：本实验室筛选并保存
# Y% w9 e3 L" `/ N0 c1 g) ^用途：木聚糖酶生产菌，产酶1500U
培养基：淀粉－麸皮培养基
发酵：通风发酵罐，24h
研究状况：中试（2M3）
+ n0 h" l1 F( S) D( N
-----------------------------------------
5 c" K# n# I' K& t
菌种：溶菌藻菌（Vibrio alginolyticus)致病株
  g$ R1 C5 I) A4 F/ F- A) e, s来源： 从湛江南山岛患病石斑鱼上分离得，本实验室保存
: [/ [' g' f( f$ d/ v2 o; k8 d用途：研究对水生生物致病性和制备其疫苗
培养基：TSB（加2%NaCl)或TSB（加2%NaCl）
研究状况：已经制备出其外膜蛋白和全菌疫苗

-----------------------------------------

菌种：黑曲霉（Asp）
9 m, B  P! ]" _4 c6 {0 I3 x菌种信息来源：本实验室筛选并保存
) {5 Q8 _' k# p. g( }用途：生产一种糖苷酶（可选择性的切糖苷键）
培养基：底物诱导培养
发酵方式：好氧液体发酵
发酵水平：大型发酵培养
重要的提取方式:有机溶剂法抽提
研究状况：已申请专利,工业化生产中
2 A' |4 N2 K3 b4 X5 N
: z% a2 e% A  R& Q/ M3 x: k' z' T-----------------------------------------

菌种：融合株 SPSC
菌种信息来源：
+ o7 e4 M# s# l' R: \* N' I由酿酒酵母变异株和粟酒裂殖酵母变异株通过原生质体融合得到.
本实验室保藏
* @9 b% o  D" \9 W% @. t$ j9 C用途：无载体固定化酒精发酵
培养基：葡萄糖为主;工业中以玉米糖为主要原料
发酵方式：大型厌氧发酵(工业中可达万吨级)
; A$ A% {; Q, g3 _发酵水平：发酵终点酒精浓度实验室可达15%v/v;工业生产在 12%v/v 左右
重要的提取方式：沉降,过滤,精馏
研究状况：已经申请专利;基于该菌种的工艺初步实现工业化;其发酵特性有待进一步增加和改进.
其他: 基于此菌种开发的新工艺同时实现了无载体固定化细胞和废液直接循环回用,是一种较新的清洁生产技术.
( z) |( a/ B9 \; f* G8 Q
-----------------------------------------
7 y  X2 f7 M4 ]' H- X
4 R  q; @/ ?! v0 v1 a* L) J我有的宿主菌
( U+ c6 N& l- Z% [* @, _5 ?原核宿主:JM109,BL21,BL21(DE3)CODON PLUS,枯草杆菌(蛋白酶缺失)及其他一些大肠杆菌宿主
: T* w2 @* q) ^1 f6 M真核宿主:酿酒酵母,毕赤酵母
+ s" b- s0 r$ z. i% r# q各类真核原核质粒,可与园内战友交换共享.如需要请跟贴

% w, [* p( X/ X1 j; T5 H( |6 `-----------------------------------------
# O$ T: y, l) a$ @
菌种：枯草杆菌
菌种信息来源：广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
用途：肌苷发酵生产
培养基：木薯淀粉培养基（生产用）
! c# f2 t. J4 ~* J+ K发酵方式：大型发酵罐（30T-100T）好氧发酵
$ P5 o3 A8 S0 `9 }' E发酵水平：摇瓶 3-4%；发酵生产 3-4%
重要的提取方式：离子交换和碳柱
研究状况：工业化生产，总产量全国第一，水平全国第一。

-----------------------------------------
% T8 E2 q8 \# ^  i6 I6 l6 m/ j
4 S; C  f7 O, f; [4 i5 A菌种：红曲霉（Monascus purpureus W.）
菌种信息来源：本实验室
用途：红曲药材生产
6 `  A/ O0 _/ a+ N6 d8 s* f- ]培养基：大米等
发酵方式：固体发酵
发酵水平：洛伐他汀酸产率1-3%
" ^0 z+ ^5 z7 T# {" i重要的提取方式：未提取
; E. u& g' }! P/ b, @研究状况：实验室规模，大规模生产有待研究
! x1 _0 `, Q. b  O
; Y5 U7 q: \1 N0 H7 j9 p3 @-----------------------------------------
  S- R, q  V/ }
) e/ X4 d/ Q5 j  [7 P/ u& ^7 E菌种：三孢布拉氏霉菌（Blakeslea trispora）
菌种信息来源：中国典型培养物保藏中心
用途：beta胡萝卜素和番茄红素的生产
培养基：淀粉，玉米浆等
发酵方式：stirred tank reactor
研究状况：国内外有对其最优发酵环境和小分子效应物对发酵影响的研究

! p. t8 _2 q+ o' h, W* M; Y& [-----------------------------------------

$ Q2 C4 ]; }  [传上几个较大的菌种资源库的网址，供大家参考！！
. j; r& m( c' g9 S4 H0 X4 X3 Phttp://www.im.ac.cn/database.php
$ w* X) W9 r. U9 g& ^) n2 v8 hhttp://www.china-cicc.org/new/new1.htm
6 ^! Z1 ?! w9 ^. [! A5 t/ fhttp://www.gdbgn.cn/zzzyp/z-wsw.asp
3 u/ J1 N8 y! c6 }( Zhttp://www.ctcccas.ac.cn/junzhong/
2 F8 @, K: V$ v! ^$ Uhttp://www.accc.org.cn/idea.htm
4 u9 v( Z/ M# X) L5 {  I1 nhttp://spt.im.ac.cn/readResource.php?id=3579

7 ~" w  e! k' ~2 a6 @-----------------------------------------
% k! q% {( l) Q3 m# b) M
% x7 i2 W9 G3 h0 b8 T, P  U. A菌种：一株高活性纤维素酶产生菌
; [$ m% y. J; ]  }# t( T+ X用途：产纤维素酶
  V( |/ m9 v) a( R/ j( ~9 f来源：本实验室分离
# n1 S: M' s; e( b培养：以CMC为唯一碳源，摇瓶发酵2~3天
活性：较高，具体国际酶活还未测出
2 A$ z. b' ^) Q, r4 j  s研究状况：准备进行发酵优化
- j) c, ~5 A& g9 [5 `

2007-7-18 21:23:52
lwangd


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第 4 楼   
2 ^2 u+ M! k- ?1 t5 p
+ u6 J! o- F7 H: `4 g% S7 p2 @--------------------------------------------------------------------------------
% [. G  Y1 K* w9 U3 P: e: Y
) m, `& H; ?" l7 h# ]; B菌种数据资料库4(转载)

! Z% _" Q% C# j6 h5 @* w) W+ X9 E菌种：橄榄色链霉菌（Streptomyces olivaceus ）
用途：产维生素B12(核黄素)
+ u7 l* d* {- j/ W" d: V来源：中国工业微生物菌种保藏中心
培养基：麸皮汁培养基
; X$ ?) u' b/ D7 O$ Z5％麸皮汁 100毫升 硫酸亚铁 20 ppm,琼脂 1.5～2.0克 PH 7.0
6 g; u) K9 p2 d3 B* {2 P
-----------------------------------------
& R8 y; M5 n  A3 Y
, X: \; X9 S+ W& X# k1 N  Q' b菌种：灰色链霉菌（Streptomyces griseus ）
2 P5 `2 E9 `. P用途：产链霉素
来源：中国工业微生物菌种保藏中心
培养基：链霉菌培养基
& z( U2 M& Y% v- A2 F$ f7 C酵母膏 2％ 硫酸镁.7H2O 0.05％,磷酸氢二钾 0.05％ PH 7.8,葡萄糖
- J" ~6 `: X0 r1％ 琼脂 1.5～2.5％
9 A, l. V, o7 c* C6 ~. x
  U3 E6 ^6 O* G% |. ~1 n-----------------------------------------
+ q: y+ N4 W: A9 v# W! H2 U/ {
菌种：龟裂链霉菌 （Streptomyces rimosus ）
+ m: ?8 _" |& H1 [( h用途：产土霉素
; y8 _% P/ @$ o2 G. e( f来源：中国工业微生物菌种保藏中心
$ _# x2 t+ l9 C! ], s7 D! \培养基：龟裂链霉菌培养基
花生饼粉 2克 磷酸二氢铵 0.01克,淀粉 6克 氯化钠 0.5克,玉米浆 0.5
克 碳酸钙 0.8克,硫酸铵 0.8克 水 100毫升,琼脂 2克 PH 自然
0 q4 K! r! e/ y. i8 ~3 z0 G
8 ]$ O: h% }# u2 N+ A1 m6 v6 e' U-----------------------------------------

菌种：鳗弧菌（Vibrio anguillarum）
菌种信息来源：本实验室筛选并保存
9 r( X9 ]/ G& n用途：水产动物病害研究
& D1 @4 G& Q; s3 @+ l培养基：TSA/TSB培养基
9 O9 Z1 X# ~8 g+ u发酵方式：平板或摇瓶好氧培养（28摄氏度）
宿主范围:海洋鱼类等
" y. `4 b3 U/ q+ n5 Y特性:海洋鱼类等致病菌，能导致烂鳍等症状
( }- b3 ?- _& N  a5 M* e, q1 ~5 k
& d" O4 M0 D& p1 ?-----------------------------------------
, q9 `4 ]* p0 k9 X# B8 {+ Y
菌种：高山被包酶（Mortierella alpina）

6 C) D- o. y4 d. H% }' E来源：土壤中分离得到，本实验室保存
' }/ A1 `2 _6 J: @
# h. O( V3 x7 _9 h3 z, y用途：产多不饱和脂肪酸，例如AA，DHA等
  R: j. z2 N0 D0 _
培养基：PDA固体培养基，土豆500g，倒入烧杯中，加入水，煮沸30min，过滤，取其滤液于大三角瓶中，加入Glc 30g，琼脂 20g，定容至1L，加热该溶液，使琼脂充分的熔化，形成均一的溶液，用于保种；豆饼汁液体培养基则用于发酵，葡萄糖8 %，豆饼汁 54 g/L，硝酸钾 3 g/L，KH2PO4 3 g/L，硫酸镁（0.5 g/L），pH5.0~6.0，配置1L溶液，分装250mL三角瓶中，规定每瓶50mL，然后对培养基定pH到5.5~6.0，保证菌种生长环境在最适pH值以下。

发酵方式：好氧，25摄氏度

5 J- i0 E$ z; T, f保种：培养基使用PDA，每三个月要转换一次，培养条件一般是室温以下。

-----------------------------------------

菌种：恶臭假单胞菌(Pseudomonas putita)
菌种来源：本实验室在石化厂水处理车间活性污泥中分离得到
7 F. n5 J, ?. G  ~  B用途：降解氯苯
! ^, _1 R( x! J. g# P; C, X- J培养基：培养基成分ω, %（葡萄糖0. 1牛肉膏0. 1酵母膏0. 05K2HPO4 0. 05琼脂2）
3 V  H9 Q8 t: x( e发酵方式：摇瓶好氧发酵
研究状况：实际运用中,降解率44.6%

-----------------------------------------

% B  X; k( q5 X7 y菌种：粪链球菌(Streptococcus faecalis)
6 G+ @. l5 t0 ]$ e6 ]: `菌种来源：本实验室在石化厂水处理车间活性污泥中分离得到
用途：降解氯苯
培养基：培养基成分ω, %（葡萄糖0. 1牛肉膏0. 1酵母膏0. 05K2HPO4 0. 05琼脂2）
发酵方式：摇瓶好氧发酵
5 Y& p, D6 Q. }' S; G' b0 t研究状况：实际运用中,降解率60%以上
8 ~/ c7 {0 l& ^PS：据我所知目前还没有链球菌属的菌株有类似功能，可以说是首次发现。
: ?% Q; K8 V% A8 ?; s/ \, n目前我正在对其是否有致病性进行研究。
. J  ?# C* ^: k7 M/ ~! @) c. \2 f
# Z4 G* l1 ]) G: z2 [-----------------------------------------

+ B( T: z: o5 m% ^, J' W9 k菌种：黑曲霉（Aspergillus niger RB）
菌种信息来源：江西赣江制药厂
$ `* {0 B. c& ^7 p6 X# y用途：葡萄糖酸发酵生产
培养基：木薯淀粉培养基（生产用）
发酵方式：大型发酵罐（15T-30T）好氧发酵
发酵水平：摇瓶 18-20%；发酵生产15-18 %
# N1 Y" a5 i3 e8 Z3 k重要的提取方式：加弱碱（碳酸钙）中和再结晶
: A% l# B# a+ v* ~0 R2 e: I研究状况：工业化生产

7 ^, |- U+ f/ C; g' x- F-----------------------------------------

5 r7 `  i$ i  l% T4 x菌种：土曲霉（Aspergillus terreus）
* `- e7 }# a: c: d菌种信息来源：福州抗生素二厂
用途：洛伐他汀发酵生产
" z# ~  B/ C2 q& p$ ^. [  v9 a培养基：葡萄糖培养基（生产用）
发酵方式：大型发酵罐（30T-80T）好氧发酵
发酵水平：摇瓶 13000-15000单位；发酵生产 10000-12000单位
重要的提取方式：乙酸乙酯萃取
* Y# w6 Y3 ~' w研究状况：工业化生产
) N, Y) E8 v& G
-----------------------------------------
$ H# U- o. s$ L8 _* J% E  N+ O
/ X: W9 }' S* G5 ~6 p3 g/ x菌种：里氏木酶
菌种来源：日本，现本实验室研究用
用途：纤维素酶生产
0 ]0 A6 X0 f! {" ~) x, g培养基：Avicel为主要碳源
发酵方式：摇瓶、5L小发酵罐
0 Y: R2 ~% l$ l2 l6 }* N发酵方式：好氧
+ |- C2 p# i7 h( e" G6 c5 Q研究状况：菌种诱变


$ |$ D5 i) D* W+ b2007-7-18 21:24:34
% N8 T( w. E8 x' I! Z1 Elwangd

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第 5 楼   
. I) W( j$ A  F% r. g0 c% r3 l
--------------------------------------------------------------------------------

4 e& P" m/ P. p  C& s菌种数据资料库5(转载)
9 C6 d6 u; w( G
菌种：Agrobacterium tumefaciens
用途：CoQ发酵生产
- Q! f0 \$ f( d+ l5 K* \* x. V+ G4 c7 l发酵方式：摇瓶
发酵条件：摇床220rpm
培养基：普通培养基
提取：皂化方法
0 C, j$ D) d4 T4 E检测：高效液相色普
9 v# x( ]. F  i8 s5 {1 \1 {现状：实验中
) T1 Q" ^: }) \- E
# W3 Y6 q/ O( m-----------------------------------------
( X  r$ _) w! Q$ ?: P# o
9 _' ]5 s8 O$ @6 P' B; f) B+ y本实验室现有可供交流的宿主系统和载体如下：
2 ]# _9 }* N$ B3 `& d) {原核：pGEX-5X,pGEX-6p,PET30,
' E& b# z$ ]' z0 l0 M# T! b感受态菌种JM109(DE3) ,BL21，BL21（DE3）,DH5a，TG1
: z; _  r5 V% v3 ?* T7 o5 [真核：毕赤酵母系统及各种质粒载体，杆状病毒Bac-N-Blue系统和pFast系统及各种质粒载体，鸡痘病毒系统和pcDNA系统。
" ^* E. n0 S" O0 @! M4 c
-----------------------------------------
# J( I9 T9 ?$ B6 j( \
菌种：恶臭假单胞菌(Pseudomonas putita)
菌种信息来源：农药污染的土壤中筛选分离
用途：能高效降解各种有机磷类农药和神经毒剂
培养基：LB Medium
% ]. Q/ V' d+ T: |研究状况：代谢途径，降解基因，酶学等已研究清楚，已获专利，大面积应用
本实验室建立了150余株降解各种有毒难降解化合物的环境微生物菌种库。
, N( Y* _6 e5 n, B0 Q) G0 }, _4 ]
. t' H% _' A; {- i# C( c7 Z-----------------------------------------

2 _" }- \6 e7 L菌种：雷布列菌
菌种信息来源：日本研究人员在淹渍的蔬菜如黄瓜等上面发现一种新的乳酸菌
用途：这种菌具有生产α-IFN的能力。将该菌制成片剂或药丸，服用后70％的人增强分泌α-IFN能力，提高免疫力。
; s, ^5 @# h" Y6 \4 n& ~培养基：目前还不清楚
发酵方式:在淹渍的蔬菜如黄瓜
研究状况：这种菌具有生产α-IFN的能力。将该菌制成片剂或药丸，服用后70％的人增强分泌α-IFN能力，提高免疫力。

% U4 I1 i- y0 v2 ]! A& V9 e' N-----------------------------------------

菌种：产蚁酸草酰细菌，具有消化肾结百的特殊功能。它能产生一种酶直接裂解草酸（乙二酸），避免与钙结合形成结石，从而降低肾结石发生率。
8 {. D2 f( H- T; W$ _4 U: w菌种信息来源：美国新发现的一种细菌
用途：能产生一种酶直接裂解草酸（乙二酸），避免与钙结合形成结石，从而降低肾结石发生率。
* p4 j0 I) Q2 }& }: y7 [. ?培养基：不明
发酵方式:不明
研究状况：不明
$ i- L! ]. L! |+ x, C3 ^这是几种新发现的细菌,有些资料还不清楚请见量
4 ]0 i+ M/ I+ {7 o8 v& v$ N
. Y" H+ K& o6 M5 D2 a6 X" G-----------------------------------------
- ?" {$ C+ l9 l
菌种：抗药细菌
9 C2 \% o8 O" ^菌种信息来源：美国研究人员发现一种抗药性新菌
用途：对几乎所有的抗生素产生抗药性，即各种抗生素对它均无抑制或杀伤作用。
+ a. R# {0 H8 J/ U& S: u$ m培养基：目前还不清楚
发酵方式:不明
9 F+ m4 }* k) H" q$ ]7 T; K研究状况：该菌的发生和蔓延向人们敲起警钟，因为这类菌不仅具有抗药性，而且其抗药因子（R因子）可交替传播。
这是一种新发现的细菌,还希望各位战友给予补充!!
; j5 a% B0 o, S4 J8 i
7 e/ [' B, z  b# e, m- ]-----------------------------------------

5 j& e% s1 K6 e! Y; Y* z美国一个研究组从海底岩石上找到一种新的细菌叫Shewanella collwellii，它能大量分泌一种天然生物粘结剂，系一种多糖粘性外聚物，命名P．AVE．有较高的实用价值。
3 k0 ^1 q5 i) H- r
0 j+ E3 R; g: f# ^! l: ?美国研究人员发现一种能食砷（俗称砒霜）的微生物，命名代号为NIT—13，该菌繁殖快，活动能力强，利用它可大面积地处理含剧毒物质的砷，可为保护生态环境做出贡献。

6 S1 R% d: t# x4 y" f0 F& j# ~-----------------------------------------
0 e6 _; C1 c% \+ j
, q$ q, U! P) _$ G3 K% ^$ D4 G下面介绍几种没有细胞壁的微生物:
(1)菌种：L-型细菌（bacterlvt L form）
菌种信息来源：细胞壁缺陷细菌是英国Lister研究所的克兰伯格（Klieneberger)在1934年研究念珠状链杆菌（Strepto－bacillus moniliforms）时首次发现的，故命名为L-型细菌
用途：对几乎所有的抗生素产生抗药性，即各种抗生素对它均无抑制或杀伤作用。
培养基：在液体培养基中漂浮生长为絮状或颗粒状。固体培养基上生长缓慢
发酵方式:在实验室条件下可以通过在培养基中加入抑制细胞壁合成的药物，如大环β-丙酰胺类抗生素、杆菌肽、环丝氨酸、甘氨酸等或因培养基中缺少合成细胞壁的成分，如二氨基庚二酸、赖氨酸等获得L-型细菌。也可用亚硝基胍、紫外线、氯化锂等诱变获得。在自然条件下由于细菌本身产生自溶酶而自发产生L-型细菌。不适当的使用抗生素、抗体补体的作用、机体的免疫力下降、内分泌的变化及不适宜的温度、营养成分、酸碱度等均可诱导产生L-型细菌。
7 n( y! }6 `+ e, I% W8 x研究状况：L-型细菌在疾病诊断和治疗、菌种保藏机制的研究、发展农业、研究细胞功能等方面均有重要意义。
(2)菌种：类菌体（Bacterioid）
用途：是根瘤菌固氮的主要形式。培养基：目前还不清楚
研究状况：是根瘤菌在根瘤中形成的一种特殊形态，随着根瘤菌进入根毛，菌体逐渐膨大为粗杆状或球状，有的一端膨大或分叉为梨形、棒槌形、“T”形或“Y”形等，染色后可观察到明显的环节状。
' I# p4 [8 S6 X4 t1 P(3)菌种：支原体（Mycoplasma）
菌种信息来源：支原体是1898年Nocard和Reux从患胸膜肺炎的牛体中分离得到的一种病原物，定名为胸膜肺炎微生物（Pleuropneumonia organism，简称PPO）。是目前最小的能够独立生存的生命形式.
* [; M$ C4 t2 O& @! v& g: f用途：对几乎所有的抗生素产生抗药性，即各种抗生素对它均无抑制或杀伤作用。
* i+ q' ?4 a3 `培养基：其生长条件要求苛刻，一般需再补加固醇、脂肪酸、血清、蛋黄及酵母汁的固体培养基上方可形成直径0.1～1.0mm的“油煎蛋”状微小菌落
. M6 ?' e# ]1 j, a9 F发酵方式:菌体生长缓慢，多为腐生或共生，少数为寄生，且为细胞间寄生。
  s! {1 R7 h6 x7 I- g研究状况：除肺炎支原体外很少使人致病。支原体常分布于土壤、污水及节肢动物或脊椎动物体内。
(4)菌种：类枝原体（Mycoplasma-like orgamism）
菌种信息来源：是1967年日本土居养食二等利用电子显微镜超薄切片方法对感染桑萎缩、马铃薯丝枝和翠菊黄化等植物进行研究时发现的一类病株韧皮部筛管细胞中存在的大小介于病毒之间的病原菌。
# A1 a4 s& s/ C/ T/ T  O用途：类支原体常寄生于植物体内，为植物致病菌。至1986年由类支原体引起的植物病害已达200多种。
培养基：很难人工培养，少数能够培养的类型在固体培养基上形成微小的“油煎蛋”状菌落
+ w( A  ^7 ~4 F5 M+ t研究状况：目前虽少数类支原体已确定为支原体，但由于多数类支原体难于人工培养及纯化,故无法进行分类上的关键性研究。
0 H2 g+ s" R) f# G0 {7 B4 v1 J0 ?
8 @+ C0 v& o4 Y. k" d: }9 q& g-----------------------------------------
5 _( b  b& H( ?) R
菌种：磁性细菌
菌种来源：俄罗斯科学院生物化学与微生物学研究所
; d' b. D& F% ~, n# h. A用途：细菌能在自己内部形成含有钴和铬离子的磁性物质，这些内部物质的磁性只起一种辅助作用，可保护细菌，防止其金属溶液中毒。
培养基：含有铁离子的细菌完成着重要的生理功能，它能促使无氧细菌向周围的磁铁移动，并在移动过程中使细菌进入到对于自己有利的无氧区域。在这里，某些细菌可能利用这里的化合物作为培养基
发酵方式：无氧
) ?3 F, y( w' B) C# I1 s( }, V4 X研究状况：它的功能是保护细菌，以及防止无氧细胞被氧化。
由于这是一种新发现的细菌,部分资料不明,待查明后一并补充

-----------------------------------------

菌种：纤维堆囊菌
菌种信息来源：山东大学生命科学学院
用途：产生的埃博霉素（ Epothilones）埃博霉素与重要的抗肿瘤试剂紫杉醇有相似机制的微管稳定活力，但其水溶性更高，分子量更小， 结构更简单，对耐紫杉醇的肿瘤细胞也有将活性，被认为是紫杉醇的更新换代产品.
: {, b0 }, m4 e培养基：肉汤含抗生素培养基
$ S0 }4 o& a5 t6 A, Y3 a4 \& Q  k% B研究状况：属粘细菌类（Myxobacteria）,是一类单细胞的革兰氏阴性杆菌，在系统分类上属于多变细菌（Proteobacteria）类群的δ分支。 粘细菌在自然界中分布广泛，但粘细菌的分离纯化非常困难。 一般情况下，获得一株纯化的粘细菌需要几个月的时间，有些粘细菌类群的分离纯化甚至需要1－2年的时间.

-----------------------------------------
+ O6 B, v. O, L9 _5 D  J
菌种：厚孢轮枝菌(verticillium chlamysporium)
菌种信息来源：本实验室
用途：植物病原线虫的生物防治
2 m$ x* Q0 _" k+ a发酵方式：固体培养或液体深层发酵
* p/ M" x; q$ o3 ]1 C8 z发酵水平：
6 z* r: l9 R( w重要的提取方式：制备生防菌剂
研究状况：目前国外及国内已有商品化生产，但存在防效不稳定的现象。

9 a6 T4 J8 o) [9 I$ n
2007-7-18 21:25:38
' R6 }* P9 @; l! Tlwangd
2 D8 s6 l9 |: p
. U: v* m- p4 p3 }- z
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' j/ R( a" Q* i5 }( j第 6 楼   

8 I$ ~/ L" |$ N7 @--------------------------------------------------------------------------------

菌种数据资料库6(转载)
0 i: W- d8 j+ E9 m8 c/ w- q- |
菌种：灰色链霉菌
$ a& V; i0 b: j: ?& m& f5 [来源：本实验室筛选保存
4 }) h5 N$ Q) N. b用途：种子包衣的驱鼠剂
培养基:使用筛选配方得到的 ，目前摸索中
发酵方式：固体培养或是液体培养 摇瓶或50L罐
发酵水平：正在进行中
重要提取方式：正丁醇萃取
研究规模：中试

-----------------------------------------
- M' [! @8 q6 X( D  O/ o8 a
8 l( k2 a! z* u- ]/ r  f( H菌种：烟曲霉（Aspergillus fumigatus）
% E" Y# [  ^, q8 `' O6 R6 O* g菌种信息来源：中国食品发酵工业研究院CICC2168、2424
" I6 [% r" ]4 x* c" Y用途：植酸酶、木聚糖酶等半纤维素酶类发酵，用于饲料添加剂或纸浆漂白等方面。
+ [6 ^9 t0 I( j5 n5 }. X9 K% Z2 l培养基：5B麦芽汁培养基
/ H/ Z5 M7 z. i4 D# c$ s' |$ I发酵方式：摇瓶好氧培养
抽提方式：提取路线与一般酶提取相同
3 |! O/ N# [3 M0 m! W6 m研究状况：国内重要的工业化菌株。
2 l, {4 P4 R! t" \9 p& Y. Q
-----------------------------------------

3 B0 T8 k3 R6 O; B" B0 }# h  g5 Q菌种：绿脓杆菌（P.aeruginosa），大肠杆菌(E.coli)，白色念珠菌(C.albicans)，黑曲霉(A.niger)，金葡（S.aureus）。
菌种信息来源：我来到这个公司的实验室时就有，日本总社拿来的。
培养基：DHL琼脂培养基，DHL琼脂培养基，PDA培养基，PDA培养基，manitol 琼脂培养基。
" f# b! A8 z- d/ q. X培养方式：平板培养，冷冻保存。
; ?' P; v0 P2 |$ D/ p1 U3 T保存配方：普通营养培养基（增菌用）+10%甘油（Glycerol），混匀后121度，正压灭菌使用。

! k8 S% b" Z3 l) J' x* F-----------------------------------------

菌种：Saccharomyces cerevisiae SIPI-1886
菌种来源：德国
用途：产S－腺甘蛋氨酸（SAM）
培养基：葡萄糖，蛋白胨，酵母抽提物，等无机盐
发酵培养基：葡萄糖，蛋白胨，酵母抽提物，硫酸铵等微量元素
& D9 K4 j. a$ K; C2 g: V发酵方式：5t，10t罐
- Z, U, ]4 e8 p4 t; h. e# i
6 ~! R. |% z# q! C9 S, X8 Z( n-----------------------------------------
) T6 U! K$ K# _, d" A
菌种：顶头孢霉(Cephalosporium acremonium Corda)
! N! ]9 A. g- F: _菌种信息来源：Habitat中筛选分离
用途： 用于生产cephalosporinC
, D$ b; A5 t8 W, e培养基：蔗糖 30克 硝酸钠 2克,硫酸镁.7H2O 0.5克 氯化钾 0.5克,硫酸亚铁74H2O 0.01克 磷酸氢二钾 1克,琼脂 15-20克 蒸馏水 1000毫升
研究状况：菌株基本特征，实验室水平（生产头C）
, ~8 O" x  ^. s$ t/ |; {保藏地：山东大学微生物技术国家重点实验室菌种库
* ?" @% R1 G$ ^) q
6 A0 l/ B8 a5 ?/ X  C0 y-----------------------------------------
0 x+ _; N# G* N! c
菌种：高温单孢菌（Thermomonospora）
2 N0 X% {" I4 c* _; v9 B' D菌种信息来源：本实验室筛选并保存
. Q" V( t: i6 f用途：分解纤维素（目前已用于堆肥处理）
培养基：自制
发酵方式：平板或摇瓶好氧培养

-----------------------------------------

9 I* N: Y6 H4 s4 E% `" Z菌种：肠膜状明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides菌属的1226号菌)
菌种信息来源：中国医学科学院血液学研究所筛选分离
用途： 用于生产Dextran
培养基：蔗糖 15克 ,硫酸镁.7H2O 0.5克 磷酸氢二钾0 .2克,琼脂 15-20克　蛋白胨0.2 纯化水 100毫升
保藏地：各右旋糖酐生产企业和中国医学科学院血液学研究所均有

& i) F; \. ^3 T5 z* P-----------------------------------------

菌种：曲霉菌Aspergillus ochraceus
菌种信息来源：本实验室筛选并保存
- T* O+ ^2 C6 D* F. ~用途：产生statins类物质
培养基：X培养基：黄豆粉玉米浆等
发酵方式：摇瓶好氧发酵
发酵水平：中试试验中
1 k% p( `/ j' f重要的提取方式:乙酸乙酯抽提
研究状况：已经申请专利，正处于开发阶段
& q9 ]# c% I2 O, t
-----------------------------------------

5 X' A' a6 C& P3 A5 c8 t菌种：短小藏青霉菌
菌种来源：未知
用途：产霉酚酸
培养基：豆饼粉，酵母膏，植物油，无机盐消泡剂等
发酵方式：摇瓶，种子罐，发酵罐
7 S$ A; g) r+ t3 p0 d; p发酵水平：20T
! o3 \& I. `5 q; _" @! ^" J: r提取方式：酒精抽提
研究状态：正在报批

$ r9 e( p3 T- v( R' w-----------------------------------------

菌种：禾长蠕孢菌
菌种来源：田间感病杂草上分离
* |1 O+ M5 x9 H$ R0 y. v+ u- D用途：产杀草毒素
0 g- j4 P7 E* h) v2 e, t培养基：PDA固体培养基
发酵方式：摇瓶、静置
研究状况：试验阶段
6 a: s. i1 z3 s7 a
- K9 W$ V2 H6 @9 D6 {
2007-7-18 21:27:24
lwangd

4 ]( `3 `. W  d4 K8 ]  B0 w5 p) P6 {, ~
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7 c2 y$ I3 v& f9 ?
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菌种数据资料库7(转载)

菌种：南极假丝酵母(Candida Antarctica)
菌种信息来源：本实验室自己保存
0 g4 a+ @* x- C* k8 C用途：用来产生脂肪酶，南极假丝酵母脂肪酶具有许多优良的特性。例如该酶A型在相对低的pH条件下具有高的热稳定性， B型具有其特殊的结构2，在水解和有机合成反应中具有高度的立体选择性，到目前为止，该酶被认为是催化氨解反应的最适合的酶.
培养基： Pharmamedia 50g,，酵母膏2g，蔗糖8g，豆油50ml，K2HPO4 5g，MgSO4.7H2O 1g，甘油聚醚0.86ml。
发酵方式：斜面、摇瓶在到发酵罐（DS-Y-15L型发酵罐）
发酵水平：发酵罐培养后酶活力可以达到6.9U.ml-1
) `1 J. T  u+ @3 ?重要的提取方式：发酵液在5000rpm条件下离心10min，去除菌体，再用无水乙醇提取。
# T1 B# k8 l8 p) ?# W1 Q研究状况：有人已经成功的利用该酶（两种型号）各自对底物的特异性，合成了抗抑郁药帕罗西汀的手性中间体，这两种酶在有机合成领域具有很大的应用价值。目前生产南极假丝酵母脂肪酶的培养基成本高，发酵周期长，对降低生产成本不利。
5 y; O! Z& S( z# \  m4 e其它：本人认为该项研究有发展前景.
- s& Y6 X" J  u9 b$ P) T4 [
( O! d0 f0 b$ _+ c; ], V; `/ h-----------------------------------------
! U6 j" P% S% \8 J
5 o2 W, n' I4 D3 g. Q# A3 E菌种：尖角蠕孢菌
+ @3 z! Y7 n- l! q% ~菌种来源：本实验室自己保存
用途：用于筛选具有杀草作用的化合物，较重要的生防菌。
培养基：PDA斜面
, T- z- L+ d9 E- T* \& e: z' R发酵方式：黑暗条件下摇瓶培养
研究状况：已初步分离一些物质
! v7 }4 a; J1 t4 c
-----------------------------------------
4 P! J# s8 \% G( D( F% `" u
菌种：顶头孢酶菌
; w5 D( H9 h; s0 _5 h用途：发酵产生7－ACA
培养基：豆油、淀粉为主的培养基
发酵方式：平板或摇瓶好氧培养
1 u/ }+ N; K0 F/ q* k) b9 {" i研究状况：已经进行生产
发酵水平：3－4万单位
现在状况：已经用于60T、160T发酵罐生产，福抗。华药、石家庄制药都在生产
8 h9 a( P4 U6 ]* A5 t% }5 q菌种来源：意大利或者韩国

-----------------------------------------
4 c5 W4 \9 E# h- j& ]  D7 u
, m8 l1 y) R# q9 Q( ]5 R菌种：地衣芽孢杆菌
来源：市售发酵菌剂
+ Y, V7 j) A6 o特性：抗病，强纤维素分解能力和除臭能力

# c5 ]6 i+ W7 V% Z/ N-----------------------------------------
# M! v8 [, h0 C! {. W" G$ @
. h( n* h/ h/ l2 {/ G: }) B菌种：侧胞芽孢杆菌（BREVIBACILLUS LATEROSPORUS）
& E% F! S* s( d5 t/ `1 n菌种信息来源：本实验室筛选并保存

用途：植物寄生线虫的生物防治，产生碱性，中性蛋白酶和抗真菌物质。
培养基：YPD或肉汤培养基
. S' x( D% ]5 j7 B+ I& p( n4 j
发酵方式：平板或摇瓶好氧培养
研究状况：已初步分离一些物质 及其基因
. q; }+ m5 V2 k2 Y# e
: b% r. t: w  p+ c8 C-----------------------------------------
4 |0 v7 u1 n: Z! L6 K' [2 }5 U' K8 V$ T9 @
  `2 W. R! j, q. A5 T' N* h菌种：林可霉素产生菌
菌种信息来源：本研究所在污泥筛选
用途：林可霉素发酵生产
' P/ d. [4 o0 B! L8 l培养基：高氏一号
发酵方式：摇瓶好氧发酵
发酵水平：摇瓶8000U/mL
& Y8 l9 m' p/ c# p/ ~! s) S重要的提取方式：提取路线:丁提
研究状况：
' |$ J0 |3 ?; M/ G
2 g2 `+ N  z$ T, }" F# V. O2 |' I-----------------------------------------
3 \# i. B5 `: M5 k: F
" {# i; E! g9 [* Z现在生物防治愈来愈热，研究的人员愈来愈多。现将本实验室的菌种研究信息告知：
, Z" x2 |. {/ ~/ T) A菌种：弯孢君（Curvularia lunata)
菌种信息来源：感病的稗草株
, X/ g* _$ K& J9 f! D- w, [6 J+ i用途：稗草的生物防治和抗稗草的毒素的生产
培养基：PDA或稗草基质
发酵方式：好氧发酵
重要的提取方式：孢子用吐温冲洗即可，毒素用一般的有机物质如丙酮、乙酸乙酯即可
研究状况：处于实验室改造阶段，毒素已被分离和鉴定
% }: J) F  z. F. S
! U, u' D/ B& W+ n) w1 Y% U+ V% e菌种：禾长蠕孢菌稗草转化型（H.gramineum Rabenh.sp.Echinochlia)
2 \) Z2 I" Q/ b8 m9 }1 N/ i菌种信息来源：感病的稗草株
用途：稗草的生物防治和抗稗草的毒素的生产
培养基：PDA或稗草基质
发酵方式：好氧发酵
重要的提取方式：孢子用吐温冲洗即可，毒素用一般的有机物质如丙酮、乙酸乙酯即可
; c, h! U, p- l4 N研究状况：孢子悬液已被开发为生物除草剂，正处于生产研究阶段
" h$ J# m5 k3 Y" _
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9 Y+ o0 [  e  i8 U& j4 X与龋病有关的细菌：
变形链球菌：
9 ~6 C3 N: h' }4 S% BATCC 25175、ATCC 10449、NCTC Ingbritt、GS-5、K(1)、FA1-(J)、OMZ 49、OMZ 175、LM7-e、AHT-a、JH-145、BHR-d、BHT-b、GS-5、HS-6.
血链球菌：
ATCC10556、ATCC10558、RE-7、34.
远缘链球菌：
0 f+ ?4 i( p0 |9 R  ]3 UATCC 6715、ATCC 33478、ATCC faecalis.
" @" z, x( W7 O; s4 r4 X! ~6 O放线菌：
7 P, I, Z) A0 B( }+ B内氏放线菌ATCC 12104、内氏放线菌ATCC 45、黏性放线菌ATCC 19246、黏性放线菌ATCC 5951、黏性放线菌ATCC 5519、黏性放线菌ATCC T14V.
; e' g' g& P; ~$ ?3 j6 Z8 E其它：
革登氏链球菌ATCC gordonii 、牙髓卟啉单胞菌 Pe ATCC 35406 、唾液球菌ATCC 25975、中间链球菌ATCC 27335、轻型链球菌ATCC 9811、发酵乳杆菌ATCC 14932、嗜酸乳杆菌ATCC 4356、奈瑟氏菌Neisseria subflava, ATCC 14799.
8 H6 V1 R* _/ f+ _' W
: v7 ]3 n2 a# u' c* ]$ h与牙周病有关的细菌：
& Q/ _# k! }& ^  f卟啉单胞菌PG ATCC 33277、中间普氏菌 PI ATCC 23256、具核梭杆菌Fn ATCC 25286、伴放线放线杆菌 Aa ATCC Y4、伊氏放线菌、具核梭杆菌 Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum ATCC 23726、产黑普氏菌P.nigrescens ATCC 25261 .

% b& B4 Z  u" ?其它细菌：
腐生葡萄球菌ATCC 9841、葡萄球菌Staphylococcus、粪肠球菌Enterococcus、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、大肠杆菌、白色念珠菌ATCC 76615、粪链球菌ATCC19433 、咽峡链球菌Streptococcus anginosus strain NCTC 10713、内氏卟啉菌P.levii 、松鼠链球菌S. sciuri NCTC 12103、链霉菌Streptomyceskurssanovii ( Bacteria) ©. ATCC 15824、10409=Xenorhabdus nematophilus ATCC 19061、Streptococcus ferus IS-8、藻青菌ATCC 27175、粪链球菌Porphyromonas asaccharolytica ATCC 25260、ATCC19433、假单胞菌ATCC 17812 .
* m8 l2 b# V4 K
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关于菌种资源国家这几年有两项课题值得称颂，一是948引进项目，我们从国外的几个菌种保藏中心比如美国的ATCC、德国的 GSMZ等引进了几百株菌种，其中很多是模式菌株，丰富了我国的菌种资源，目前已经完成。二是科技部的微生物资源平台项目，由农业微生物菌种保藏中心主持，联合全国其他国家级菌种保藏中心和全国其他有关单位，通过制定和执行微生物菌种描述规范，统一标准，建设微生物资源共享机制，来整合中国的微生物资源，目前项目正在进行中。后者是关于我国微生物资源的一件大事，项目完成后，将实现中国微生物资源的菌种共享、信息共享，当然这一进程是一个浩大的工程。现在我们可以浏览各个保藏中心的网页，上面有关于菌种信息的比较全面的描述，随着平台项目的进行这方面的工作应该会更完善。到时对于我们这些微生物方面的应该会有很大的帮助。有一点我们不能回避，那就是不可能每个菌株都有详细的研究。

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1 t$ ]+ O$ h# W
菌种：破伤风芽胞杆菌
菌种信息来源：中检所
9 O9 |. d# L4 M; j# S1 S用途：破伤风类毒素生产用
% ^5 x$ t& S. {: n0 N+ f培养基：双胨培养基（生产用）
发酵方式：100万mL发酵罐厌氧发酵
发酵水平：产毒50--150lf/ml
' Y, f% A" d9 y+ G4 A( j* {$ L8 U重要的提取方式：硫酸铵二段沉淀法
研究状况：疫苗生产


2007-7-18 21:28:46
lwangd


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7 Z9 r* j* i0 O$ j5 p注册：2006年11月15日
第 8 楼   
9 t3 n/ z) D* g, b
; z% }! I$ m# R7 |--------------------------------------------------------------------------------

8 O- p+ `8 |4 S菌种数据资料库8(转载)
, ^0 E1 x" B7 E( n/ p; N! i
( ~; z/ t8 n. n2 w) `. }/ A9 m菌种：白喉棒状杆菌PW8株
菌种信息来源：中检所
2 L8 e8 y1 E& e$ c/ q0 Z; \0 [用途：白喉类毒素生产用
培养基：改良林氏培养基（生产用）
3 v1 L2 c8 {" h0 N2 `* f发酵方式：80万mL发酵罐搅拌发酵
! s, \  k+ K! t发酵水平：产毒200--500lf/ml
+ Z8 v+ V3 d: ]3 f# s8 b重要的提取方式：硫酸铵二段沉淀法
" b% {: V2 |7 Y' E" h研究状况：疫苗生产

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菌株号： 355 细 菌

5 t- Y$ Q1 d$ h* ~) e+ QMycoplasma hyopneumoniae Mare and Switzer
8 z- c7 H) M  M4 N/ ?- Y猪肺炎支原体

0 o4 x* d3 N9 Y% M3 y355←上海兽研所，济南系Z株。由354株强毒通过兔体传代致弱。低代毒使猪肺部感染致病;高代毒毒力
弱，产生良好免疫力。检验菌苗和制备抗原。培养基21，37℃
0 k* Q0 R. F+ t9 i* B
1 K- N2 r( u5 h. M3 e-----------------------------------------
' K" }# ^' e7 d& u! u$ z. B
菌种：节杆菌
菌种信息来源：农药厂污水处理池中的活性污泥
" t1 ~# _, S: G$ {1 B用途：降解有机磷农药
0 N+ H, f0 }& i* w) C! P培养基：含农药的普通肉汤培养基
2 p* i' O+ `. O- {发酵方式：平板或摇瓶培养
研究情况：正在研究酶学性质，以待实际应用
7 D4 w! K/ c! E8 `7 _( S* K0 F
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  b, E1 D5 P) W! i. j
菌种：青霉菌（Penicillium chrysogenum）
6 f6 G. _8 A2 z4 P菌种信息来源：华北制药
用途：青霉素发酵生产
9 {. D; K- |8 h培养基：麸质水、花生饼粉、硝酸铵、尿素、葡萄糖结晶母液流代硫酸钠、硫酸钠、磷酸二氢钾、碳酸钙等。
/ j# f8 u& U, a9 l& P( i发酵方式：三级好氧发酵
发酵水平：国外最高达10万u/ml以上，发酵周期7天。国内发酵周期8-9天，发酵水平7万u/ml左右。
% @# M# ~1 e  ~重要的提取方式：发酵液过滤，乙酸丁酯萃取，加入乙酸钾－乙醇溶液结晶。
研究状况：工业化生产
; o# n  k' S. L5 O6 F0 a" y7 H- O
, d, Y  `6 ]9 {' E8 T, t- L/ ^-----------------------------------------
% j+ l! [2 R: d9 k1 W
菌种：金色鏈霉菌（Streptomyces aureofaciens）
* g3 K4 a. r) U菌种信息来源：华北制药
用途：四环素发酵生产
& a8 }  R5 |* C/ i培养基：淀粉、秈米粉、玉米粉、淀粉酶、玉米浆、花生饼粉、黄豆饼粉、蚕蛹粉、酵母粉、旦白胨、硫酸镁、硫酸銨、溴化钠、碳酸钙和M－促进剂等。
发酵方式：二级好氧发酵
4 g2 C" }! n* h8 y发酵及提取水平：发酵单位31000u/ml左右，碱收率100-103%，转盐收率91-92%，总收率93±%
7 h' c. K& v* m5 j% i重要的提取方式：利用四环素是两性化合物在pH5左右有一等电点的特性，以氨水调节发酵滤液的pH至等电点，使四环素结晶析出，经分离、洗涤、干燥得到四环素。
+ ]  A& g8 }  `( K! u0 b  k' Y研究状况：工业化生产

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( u  l# w' i: q& S% |
菌种：龟裂鏈霉菌（Streptomyces rimosus）
& E2 `2 _2 m0 d) t1 u' [7 X# F菌种信息来源：江南大学生物工程学院
, X9 _: q, z( t  [用途：土霉素发酵生产
培养基：淀粉、糊精、黄豆饼粉、玉米浆、硫酸銨、氯化钠、碳酸钙、磷酸二氢钾、氯化钴等。
  e+ j5 @; J$ {5 w* Y4 y' f发酵方式：三级好氧发酵
- k& k0 \9 L5 x# `- N% n3 D% v6 B发酵及提取水平：发酵单位33mg/L；发酵周期：240hrs；畜用品提取收率94%。
4 L3 }' B2 R$ U3 Q重要的提取方式：利用土霉素是两性化合物在pH4.5-4.7有一等电点的特性，以氨水调节发酵滤液的pH至等电点，使土霉素结晶析出，经分离、洗涤、干燥得土霉素。
研究状况：工业化生产
% {1 N. {/ t/ H% O9 Y4 z7 ?其他：在上世纪60～70年代，土霉素曾经在我国抗菌药市场上占据着重要位置，但自80年代中后期起，土霉素的市场就开始逐渐下滑，大批企业先后放弃了生产。21世纪初，全国土霉素产量已从20世纪80年代的2万吨下降到12000吨，目前的产量已不到1万吨，生产企业从几十个减少到只有几个。目前主要生产企业为石家庄华曙制药、内蒙古赤峰制药、山西星火制药等。其中石家庄华曙制药的规模和产量最大，达6000吨左右，约占世界总产量的1/4。
随着土霉素产量的不断下降，出口量也逐年减少，出口价格一路走低。1995年，我国土霉素出口价格为11.5美元/公斤，1998年为10美元/公斤，2000年已降到7美元/公斤。近年来，出口量和出口价格还在下滑。在国内市场上，土霉素除了作为生产强力霉素等的原料外，主要用于畜禽药物以及饲料添加剂，临床用药微乎其微。在发达国家，土霉素已基本不再使用，发达国家畜牧业中用的也是纯度高的无菌土霉素。我国生产的土霉素大部分为低档产品，未来几年出口形势将十分严峻。
0 B4 @2 U4 e+ S9 {$ a7 r- D; j* _) r. D
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' h# m* c2 F8 z7 Q/ Q
" s* ?" @; t5 c) z; C菌种：灰色鏈霉菌（Streptomyces griseus）
/ W' L  k# g* J2 u. n菌种信息来源：山东鲁抗医药股份有限公司
用途：链霉素发酵生产
培养基：葡萄糖、黄豆饼粉、硫酸銨、碳酸钙、玉米浆、硫酸锰等。
: y, L/ B% F, o+ j发酵方式：四级好氧发酵
' c1 j8 U" }/ H3 C! J" C发酵水平：23000u／ml。
0 x8 }5 d% Y2 T/ k* x重要的提取方式：利用链霉素盐在水溶液中能解离成阳离子的特性，用离子交换法分离，提纯。
0 n. k$ F, w" Z  [! u1 V研究状况：工业化生产
其他： 链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素。属于氨基糖甙碱性化合物，它与结核杆菌菌体核糖核酸蛋白体蛋白质结合，起到了干扰结核杆菌蛋白质合成的作用，从而杀灭或者抑制结核杆菌生长的作用。
链霉素的副作用少数病人反应严重，所以，链霉素的使用必须在医生的指导下应用，千万不要乱用和过量使用。
现在我们使用的是硫酸链霉素，过去曾有双氢链霉素，因较多病人出现永久性的失聪（耳聋），已被国家医药管理局淘汰，不再生产和使用。

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9 ~, U9 R$ w: K9 |- g2 Y# t
菌种：弗氏鏈霉菌（Streptomyces fradiae）N71-2
菌种信息来源：宜昌三峡制药有限公司
用途：新霉素B生产
培养基：葡萄糖、籼米粉、酵母粉、花生饼粉、黄豆饼粉、液胨、玉米浆、硫酸銨、碳酸钙和氯化钠等。
9 P0 T3 R/ T7 k; k3 v  Q2 r发酵方式：二级好氧发酵
发酵水平：国内领先水平约25000u/ml
重要的提取方式：可与各种酸成盐，其水溶液中易解离成阳离子。用强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001×7进行离子交换。用氨水洗脱。然后经强碱性季胺Ⅰ型阴离子交换树脂201×7脱色。薄膜浓缩，喷雾干燥制得成品。提取收率65％。
' m& g( X& m7 A, j研究状况：工业化生产。
3 ^5 M$ }% Q( A9 }" c" p7 H市场：新霉素是50年代开发的由链霉菌属产生的一种氨基糖甙类抗生素。与其他氨基糖苷类抗生素相似, 在临床上具有广谱抗感染的作用。此抗生素具有一定的肾毒及第八神经系统毒性, 在临床使用上受到一定的限制。近年来该品被作为一种饲料添加剂应用。由于国内外饲料添加剂的使用量大, 应用范围广, 所以展示了较好的前景。

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- B& Q  c+ w: Q! W+ ?7 L菌种：鏈霉菌（Streptomyces kanamyceticus）
% h) Y% y! H9 Q. d菌种信息来源：上海第四制药厂
3 s' L/ {2 y+ E5 t+ A! M' E用途：卡那霉素生产
培养基：黄豆饼粉、淀粉、麦芽糖、硝酸钠、淀粉酶、硫酸锌等。
发酵方式：深层三级好氧发酵
发酵水平：国内领先水平约25000u/ml
重要的提取方式：采用强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂001×7进行提纯浓缩。用氨水洗脱。然后经强碱性阴离子交换树脂201×4脱色。加硫酸成盐，乙醇结晶。喷雾干燥制得成品。提取收率70％。
% B2 Q( z" e) L, S研究状况：工业化生产。

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  E7 w* v9 o6 N3 D+ b1 h, Z* {! \' j
菌种：小单孢菌（Micromonospora echinospora）
" h) m8 t/ \% V' i) V) J' A菌种信息来源：上海第四制药厂
用途：庆大霉素生产
培养基：淀粉、葡萄糖、黄豆饼粉、蛋白胨、豆油、淀粉酶等。
8 B% N" ~8 w. F) x6 P, n, H发酵方式：三级好氧发酵
发酵水平：国内领先水平2.0±0.2克／升，发酵时间 144小时
% N# h! a* z# [) t" s8 k4 O重要的提取方式：发酵液经酸碱处理后采用001×7磺酸型阳离子交换树脂吸附，除杂，稀氨水洗脱，201×4阴离子交换树脂脱色。浓缩、成盐、喷雾干燥即得成品。提取收率70％。
. n1 f5 A1 ?% N( B1 p研究状况：工业化生产。

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9 ^8 A5 Q# ^( z3 ~9 o1 F2 }! `" Z2007-7-18 21:30:09
! _: Z; g2 n4 \2 A5 m9 ^: F# dlwangd


: U0 `1 E* {* p4 Z2 g' h等级：版主
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. c$ Q3 q# U* h" o! t积分：4962
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  z: Z# X7 F; k
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" O. |4 S" U' a, r& p: e& o, G7 i
. |! _7 m5 }1 T4 ^! ^菌种数据资料库9(转载)
$ i/ j  o1 l% h: M1 R: z% F( u
菌种：小金色鏈霉菌（Streptomyces ricroaureus）
, a, C2 M% q, r9 K6 y- G菌种信息来源：华北制药
用途：春雷霉素生产（农医二用抗菌素类药。主要用于绿脓杆菌、大肠杆菌所引起的创面感染及尿路感染。农业上用于防治水稻稻瘟病。）
培养基：玉米油、油泥（玉米油沉淀物）、黄豆饼粉、玉米浆、酵母粉、氯化钠、磷酸二氢钾。
发酵方式：三级好氧发酵
发酵水平：1973年平均水平7230u/ml。日本用基因工程选育菌种，使春雷霉素的发酵单位提高9倍。
重要的提取方式：发酵液酸化过滤，用001×3.5强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂吸附，稀氨水洗脱，001×25强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂脱色。浓缩、结晶、喷雾干燥即得成品。
$ T- i1 t/ E& T( c  v研究状况：工业化生产。
其它：2004年欧盟出台法规草案，禁止生产和销售二甲基苯酚、二氯酚、咪草酯、春雷霉素及多抗霉素四种农药，该法规将于2005年5月31日生效。欧盟规定将以上四种农药从欧盟植物保护产品的许可清单中撤销。自批准之日起6个月内，欧盟各成员国必须撤销对含这些活性物质产品的全部许可。但欧盟委员会将允许少数成员国在特定农作物上再使用3年。这些活性物质在指定成员国用于指定农作物的使用许可必须于2007年6月30日前撤销，库存最迟要在2007年12月31日前处理完毕。
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0 }& f# H& L# m/ L4 d) Z9 o-----------------------------------------

+ V9 \2 r- x$ K! P: u1 Q# ]菌种：巴龙霉菌（Streptomyces rimosus var . paromomycinus）
菌种信息来源：清华大学国际技术转移中心
" l9 T4 g7 B9 R/ F5 h5 Q用途：巴龙霉素生产
培养基：黄豆饼粉、酵母粉、淀粉、玉米粉、玉米浆、硝酸钠、硝酸铵、食盐、氯化钾、碳酸钙、氯化钴等。
2 c* J0 @# |, q6 H# z% ]' C- m5 D2 E发酵方式：三级好氧发酵
发酵水平：8±1克／升，发酵时间 192小时。
( O' F9 Y& c! Z' g. w, F6 q9 B/ i2 E重要的提取方式：发酵液酸化过滤，用001×7强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂吸附，氨水洗脱，201×4强碱性季铵Ⅰ型阴离子交换树脂脱色。薄膜浓缩、喷雾干燥即得成品。收率 70％。
研究状况：工业化生产。

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菌种：链霉菌75－798（Streptomyces 75－798）
- ~6 h$ Y" x! C7 s  U菌种信息来源：上海医工院
用途：利维霉素（青紫霉素、里杜霉素）生产
培养基：鱼粉、玉米粉、淀粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、葡萄糖、碳酸钙等。
发酵方式：二级发酵（需要的通气量小，大时菌丝生长旺盛，但青紫霉素含量比例减少）
7 D3 V: i! b$ W发酵水平：70年代末1300－1400u/ml。
) Z  _+ C/ m8 M& x重要的提取方式：发酵液酸化过滤，用弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂111离子交换，氨水洗脱。由于产生菌在发酵过程中产生多种成分，化学性质十分相近，故将数种成分通过层析柱进行分离是提炼工作的关键。洗脱液分组收集，浓缩、脱色、结晶，即得成品。收率 67％。
' C" J2 T1 b9 {0 X" X4 H. F9 Y. Q研究状况：工业化生产。
+ `# q) {# z7 @) p
5 r3 Z" E' b& z% g9 v-----------------------------------------

$ z  }. |8 u. ?( M' Q' m2 z: w1 L# U菌种：鏈霉菌75－798（Streptomyces 75－798）
菌种信息来源：上海医工院
用途：利维霉素（青紫霉素、里杜霉素）生产
培养基：鱼粉、玉米粉、淀粉、磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钠、葡萄糖、碳酸钙等。
发酵方式：二级发酵（需要的通气量小，大时菌丝生长旺盛，但青紫霉素含量比例减少）
: z: w, U. Q  r  G2 n" t* h发酵水平：70年代末1300－1400u/ml。
$ z. E4 ^4 y8 O( \3 H- K* f重要的提取方式：发酵液酸化过滤，用弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂111离子交换，氨水洗脱。由于产生菌在发酵过程中产生多种成分，化学性质十分相近，故将数种成分通过层析柱进行分离是提炼工作的关键。洗脱液分组收集，浓缩、脱色、结晶，即得成品。收率 67％。
研究状况：工业化生产。
& Q# ~% F: [* X3 m8 t6 R# Y/ R6 d
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! I( K; ?) g1 G4 T9 [6 J
菌种：长双歧杆菌（bifidobacterium longum）
来源：健康成人粪便中分离得到，本实验室保存
用途：双歧杆菌是人体内存在的一种有益菌，它在肠粘膜细胞结合形成微生物屏障，抑制有害菌生长，以保持良好的肠内环境和人体健康。用作微生态药品或保健品，调节人体肠道菌群失调，治疗腹泻、便秘等。
0 n, P7 F5 x5 Y; M; u. f$ v: W培养基：亚硫酸铋琼脂(BS)
3 H: M" s" }2 a  {8 q7 ?, `$ q　　蛋白胨　　　10.0g
& ^. U7 ?! U# ]% P! T' X5 d! U6 y& Y　　牛肉膏　　　 5.0g
; J1 f" ^% b( d) K9 {4 l* r" h! i- k　　葡萄糖　　　 5.0g
9 e+ Q1 k* m9 s# t　　硫酸亚铁　　 0.3g
　　磷酸氢二钠 　4.0g
　　柠檬酸铋铵 2.0g
　　亚硫酸钠　　 6.0g
　　琼　脂 18.0g
/ r( X+ u  d! r2 {* R5 ?7 J4 \3 C" D　　蒸馏水　　　1000.0mL
调pH至7.0±0.2,
+ C* I1 q; I" u6 \发酵方式：厌氧培养，37℃，用斜面活化菌种，然后接种于液体培养基逐级放大，通过3000－4000转离心收集菌体。
研究状况：我室的菌种出于中试阶段，双歧杆菌预防和治疗疾病的作用在国内外医药界都得到了证实，国内已有多个产品上市销售。双歧杆菌制品正方兴未艾，人们对健康的重视程度日益提高，益生菌产业发展的潜力相当大。
" I& F  i0 \( n3 H5 G2 b) a3 d

3 m5 B" K$ W' J( a2007-7-18 21:31:19

gx0406

收藏了，好东西