停糖进行诱导表达时为何pH会上升

chuxiaohu2008

hyaline

没有好吃的碳源，只好改吃氮源阿

chuxiaohu2008

但是，为何发酵结束时（此时洗菌密度OD600已经达到130左右，也停糖了）pH又下降了呢？

a89440104

chuxiaohu2008 发表于 2013-7-3 22:09
但是，为何发酵结束时（此时洗菌密度OD600已经达到130左右，也停糖了）pH又下降了呢？

这个时候是代谢产物积累造成ph下降

xiayong

糖代谢过程中会产生大量有机酸，导致pH下降，为了维持pH，需要加氢氧化钠溶液来控制。如果补糖控制不太好，会导致有机酸根离子（一般通称有机酸）的积累。当停止补糖后，随着糖消耗完，菌开始利用积累的有机酸作为碳源并释放纳离子，pH随有机酸的消耗而上升；当有机酸消耗完后，开始利用氨基酸作为碳源并释放铵离子，使pH维持上升。因此，停糖后要将pH控制模式改为加酸控制。

xiayong

chuxiaohu2008 发表于 2013-7-3 22:09
但是，为何发酵结束时（此时洗菌密度OD600已经达到130左右，也停糖了）pH又下降了呢？

发酵结束阶段，随着营养物质消耗完或有毒代谢物的积累，细胞出现自溶，细胞内大量酸性物质释放到发酵液中导致pH下降。因此应当在pH下降前（即细胞自溶前）结束发酵，收获细菌。
还有一种情况是：发酵已结束，在进行收菌阶段，发酵液pH下降，这是因为停止供氧后，细胞代谢并未停止，碳代谢的氧化不彻底，产生有机酸。

boboheao

pH升高的原因可能是菌丝增殖速度加快，消耗氮源导致的！

苹果7585

chuxiaohu2008 发表于 2013-7-3 22:09
但是，为何发酵结束时（此时洗菌密度OD600已经达到130左右，也停糖了）pH又下降了呢？
主要是发酵结束后，大肠杆菌在讨厌氧条件下菌体自身会产酸、产气。造成pH下降。

chuxiaohu2008

学习了，感谢。

sxzh7202

葡萄糖在代谢过程中，生产三个有机酸，即所谓的三羧酸循环，加入的氨水一个作用是给菌的代谢提供氮源，另一个作用则是中和这三个有机酸，当停糖后，有机酸被代谢掉，多余的氨就游离出来，增加了发酵液的碱性，从而pH上升。发酵终点时的变化8楼正解