大肠IPTG诱导后期溶氧上升

pasteur2

大肠高密度发酵，OD涨到20-30时诱导，诱导3小时，有时能发到7-80，有时只有50左右为什么呢

只能发到50左右的生长状况为，发现溶氧上升，残糖增加，生长缓慢，请问怎么解决（CN源混在一起补料的）？


多谢

hhwang

OD最好配合镜检看看菌体的生长状态
你这种发酵结果原因可能有以下几个
菌体的生长情况不好掌握
质粒不稳定
表达产物有害
补料需要根据实际需要制订，没有统一标准

a89440104

碳氮源混合补料，可能会在特定的情况下造成比例失调，影响菌体生长

sxzh7202

补的葡萄糖太多了，产生反馈阻遏也有这种情况出现

kacey

问题比较大，也比较模糊，需要case-by-case。如果你的菌可以长到50-80 (od600?)如果测定准确的话，可以考虑菌种基本没有大的问题。
1. 补料培养基的组成？
2. 补料如何进行的？batch or fed-batch 还是其他的？
3. 如果有时候50，有时候80还是相差有些大的，那么需要分别测定80OD和50OD时菌液中糖的浓度？
4.如果你的补料两次是一致的，那么就需要考虑你的发酵控制参数准确吗？可能是溶氧或者pH不准确(最简单的办法就是看看是否每次的补酸补碱一样）

如有说的不对的地方请谅解。哈哈