网络讲堂:如何使用自动化高通量平台进行蛋白表达体系中的优化及筛选？

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网络讲堂:如何使用自动化高通量平台进行蛋白表达体系中的优化及筛选？

主讲嘉宾： 国家蛋白质科学中心?上海  规模化蛋白质制备系统运维主任 邓玮博士 嘉宾简介： ? 1999-2003年  武汉大学化学与分子科学学院 本科 ? 2003-2008年  中科院上海有机化学研究所 生命有机化学博士，从事天然产物生物合成研究 ? 2008-2012年  美国密西根大学生化系雷鸣教授课题组从事DNA损伤修复途径中重要复合物SOSS的功能及结构研究，成功解析了多个重要复合物结构，并进行相关功能研究获得重要发现。 ? 2012年-至今   国家蛋白质科学中心，担任规模化蛋白质制备系统主任，从事自动化高通量生物科学实验研究工作，参与设计了多套自动化生物科研系统，并进行相关科研应用开发。

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讲座时间：2016年9月22日 周四 10:00-11:00 讲座介绍： 在酶的定向进化 、组合合成生物学、微生物表面展示技术及高通量克隆构建等技术领域中，如何能做到高通量快速挑选克隆以提高工作效率？QPix微生物自动化高通量筛选平台可帮助实现省时省力。 本讲座将介绍其在蛋白质科学方面一种新的应用----高通量快速筛选蛋白质的可溶性表达条件，为进一步的生物化学、结构学研究打下基础。 工作流程： 1、运用C端融合表达二氢叶酸还原酶(DHFR)的载体系统高通量的筛选具有正确读码框的随机PCR克隆质粒 2、运用分段式的GFP荧光活性筛选系统快速分选出细胞内有目标蛋白可溶性表达的克隆 3、运用体外荧光筛选技术区分出可溶性蛋白表达量的高低。   图1 运用QPix进行高通量蛋白可溶性筛选整体流程示意图 图2 结合CloneSelect Imager观察荧光强弱 运用这种方法可以快速高通量判断蛋白可溶性的强弱

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