有没有人知道单抗沉淀问题咋解决呢?

lwangd8

淡蓝色的思念(378644186) 21:47:06
有没有人知道单抗沉淀问题咋解决呢 ？、、、

执著(8076321) 21:48:00
单抗沉淀是啥意思？

淡蓝色的思念(378644186) 21:48:22
就是纯化出来的单抗放一段时间 会出现沉淀。我们是用辛酸硫酸铵来纯化的 最后用PBS复溶，结果放一段时间后就会出现沉淀

执著(8076321) 21:49:03
都对沉淀作过哪些分析？

淡蓝色的思念(378644186) 21:49:31
目前还没有

淡蓝色的思念(378644186) 21:49:54
只是我们的单抗经常都会有这种情况 急求解决

执著(8076321) 21:50:21
如果是临时存放，都是冻存的，冻存和放4度都会这样

执著(8076321) 21:51:13
我们的没有

[ 本帖最后由 lwangd8 于 2008-12-16 23:23 编辑 ]

lwangd8

淡蓝色的思念(378644186) 21:51:54
你们是用什么方法纯化的呢
执著(8076321) 21:52:07
proteinA
淡蓝色的思念(378644186) 21:52:07
我们是辛酸硫酸铵
淡蓝色的思念(378644186) 21:52:19
哦，亲和的啊
淡蓝色的思念(378644186) 21:52:37
你们单抗都做亲和吗
执著(8076321) 21:52:43
你们单抗不用亲和，用什么来纯化？
淡蓝色的思念(378644186) 21:53:01
有的亲和 一般的都不会
执著(8076321) 21:53:18
先是proteinA,然后再过其它的柱子
淡蓝色的思念(378644186) 21:53:35
先加辛酸 去杂蛋白 在用硫酸铵沉淀 最后复溶
淡蓝色的思念(378644186) 21:53:55
哦 那纯度一定很高哦
淡蓝色的思念(378644186) 21:54:36
亲和纯化好像得率不是很高吧？？？
执著(8076321) 21:54:50
是啊，一般过了proteinA就能90%以上纯度，
执著(8076321) 21:55:39
那你用硫酸铵沉淀，发酵液抗体浓度是多少？
我思故我在(649313029) 21:56:05
饱和硫酸铵？
淡蓝色的思念(378644186) 21:56:10
我们是用老鼠产腹水生产
执著(8076321) 21:56:36
哦，你们的抗体浓度高
淡蓝色的思念(378644186) 21:57:16
是用饱和的
淡蓝色的思念(378644186) 21:57:44
proteinA 用来亲和纯化抗体的
淡蓝色的思念(378644186) 21:58:17
你们亲和纯化要过几次柱子啊
执著(8076321) 21:58:32
过四五个吧，
淡蓝色的思念(378644186) 21:59:20
proteinA只过一次吗
淡蓝色的思念(378644186) 21:59:42
用什么来洗脱呢
执著(8076321) 21:59:43
当然，只过一次，洗下来后，纯度就很高了
淡蓝色的思念(378644186) 22:00:04
那其它的是什么柱子啊
执著(8076321) 22:00:14
洗脱液呀，改变PH，离子浓度等，
执著(8076321) 22:00:21
每一家的方法都不一样，
执著(8076321) 22:00:48
但第一步过proteinA,大家基本上都是一样的
淡蓝色的思念(378644186) 22:00:51
可只过一次流穿里应该还有很多抗体吧 不怕浪费了吗
淡蓝色的思念(378644186) 22:02:12
就是抗体直接流过proteinA柱子后的液体了
执著(8076321) 22:03:02
不会有抗体，亲和吸附，结合性很强的，
执著(8076321) 22:04:20
如果用，产品供应商会提供基本的使用方法，