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植酸酶的热稳定性具有极其重要的意义,因为在制粒过程中暴露在高温和高湿环境下的酶极易失活,因此为保持酶的活性,要求在制粒完成后再向饲料中添加酶,但这需要饲料生产厂家另外配备设备,而且这种添加方法可能导致添加不均匀, 故提高植酸酶的耐热性,采取内添加还是具有重要的应用价值。
V9 @- S0 S/ Z, z6 @0 ?; C; T! A下面简述几种提高植酸酶耐高温性能的几种方法。
' D4 d4 m! l( R# }) j% ^: i1.产耐热植酸酶菌种选育:
1 d) O+ l1 e0 P& r5 S1 _. \酶作为生物催化剂具有许多特性。但是, 天然酶作为自然选择的产物, 也具有局限性, 因为最佳的酶不仅仅是指通过催化使反应速度达到最快,还应该包括酶的稳定性、专一性等。虽然目前饲用植酸酶的种类很多, 但很多仍无法满足人们对酶耐高温的需要。人们想尽办法寻找能耐高温的植酸酶, 这其中最传统的方法便是从环境中分离纯化新酶。
3 e" A& f- C+ x; _6 a8 d( j2.分子生物学改良技术
+ T( j( ` T- I! N, C通过定点突变的方法可将植酸酶非活性中心的个别氨基酸替换, 提高酶的热稳定性。DNA Shuffling技术也是一种酶分子改造的有效策略,DNA Shuffling的基本思路是从一种酶的基因出发。在MNA水平上对其进行改造,经过突变和筛选,最终得到性质改良的新酶。. s+ a |: b s* h0 n
3.包被技术5 p- x7 |+ ~7 o% H$ D( V
通过对酶制剂进行包被处理可以在一定程度上降低热加工处理对酶制剂活性的影响,目前研制生产的包被型饲用植酸酶在饲料工业中已取得了广泛应用。包被操作一般是在喷雾盘式干燥塔中进行。其制备过程大致如下:将发酵获得的植酸酶原液经过滤和超滤以后获得植酸酶浓缩液。把浓缩酶液与淀粉、水溶性无机盐和有机物按一定配比混合。在其加工设备中均匀揉合成面团状,经挤压、切割、圆整后制成小颗粒,再经低温气流干燥、筛分获得直径适中的酶颗粒。含酶颗粒从塔顶自上而下做分散降落运动,由塔的四周向颗粒均匀喷洒汽态包衣材料。含酶颗粒在降落过程中自身作随机滚动。不断吸附包衣物质,最终落在塔底不断转动的干燥盘上,经干燥后即成包被型含植酸酶颗粒。植酸酶颗粒经包被以后.可以被赋予一些特殊的性质,如颜色、低粉尘、保护酶不受周围环境损害等。包衣材料除了可用一些像海藻酸钠、明胶溶液、饱和脂肪酸外,有时还添加一些疏水物,如羟丙基一甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素和聚乙烯醇等.这些疏水物有助于提高酶的热稳定性。
& q/ L, Z, @* c# y4.酶分子稳定化处理8 U. e Q. C( I7 I2 n4 K# n
在制粒的过程中,酶既要承受干热处理,又要承受湿热的处理.酶不仅吸收热量导致构像发生变化,同时水分子和酶分子内氢键相互作用的破坏,使得酶的构像更容易发生变化。有研究发现无机盐离子可以提高酶的稳定性。某些金属离子、阴离子、多糖、多元醇和表面活性剂等在化学微环境中可影响酶的氢键、盐键、静电作用、疏水作用等,这种作用是由溶液离子强度增加和酶分子周围水簇数目的增加引起的。此外,盐离子能结合酶分子中的配对阴离子。降低分子内静电排斥作用,也可增加酶的稳定性。在酶颗粒中适当添加某些组分可明显提高其对饲料热加工过程中的耐受性。6 q! g! Y Z) @; ~. b
植酸酶在高温情况下酶的稳定性在实际生产中具有重要的意义。酶的化学本质是在氨基酸顺序排列成一级结构的基础上,通过二硫键、氢键、盐键、疏水作用和静电作用等化学力。再折叠成对活力发挥起关键作用的二、三级结构构象,而酶的稳定性就取决于酶是否以最小自由能的构象存在。因此,随着生物学技术的不断发展和生产工艺不断改进,可以通过从酶分子到酶生产工艺多角度来改变植酸酶的内在氨基酸结构和外界可影响其构象的化学微环境,而提高植酸酶的耐热稳定性。
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龚国利的博客 http://www.sciencenet.cn/u/gongguoli/ |
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