关于纤维载体的问题

lwangd8

五百(qq:160235453)  10:25:13
关于纤维载体的问题：
1、从NBS的Disk到台湾公司，还有我以前买的纤维载体，几乎都是聚酯纤维，纤维直径差不多是10-15um左右 。无妨纤维布的结构，是将热短纤维热丝喷到一个平面（这个平面一般是聚丙烯类薄板），纤维丝在上面互相 交错，压平后形成一块布。所以这些纤维布在普通显微镜下是不透光，看不清楚里面结构的，只有把附着底面 拆开才能看到结构，如果纤维太厚也没法看。当然如果有电镜那就不一样了，可惜我没有。
2、在纤维布上养了细胞以后，把纤维稍微拉开点离开附着平面，可以看到纤维丝。如果细胞只是长了单层， 附着在纤维丝上，那么细胞是看不出来的，因为细胞的大小几乎跟纤维丝大小差不了多少。所以只要加点胰酶 洗脱后才能看到细胞。
3、用纤维载体养细胞，细胞很容易会长成多层。像NBS的就是，有时候片与片之间的细胞会相互粘连在一起。 不过我认为这样其实已经跟组织培养有点类似了，这应该是纤维载体为什么细胞密度高的原因吧。个人认为做 生物制品这种细胞培养还是细胞只长到单层的表达效果要好一些，不知大家是什么看法？
4、关于反应器的放大问题。其实这一直都是NBS的问题。因为他们也试过大的生物反应器，但是效果不好。想 像一下一个堆积很厚的棉花团，小团的时候液体中的颗粒是很容易进去的，大团的时候颗粒只能进去外面，深 层里面就很难进去，也就是生物反应器内外的环境不一样，包括细胞密度，营养，代谢废物的排出。所以一般 小的反应器细胞密度很高，但是大的反应器细胞密度越来越低，到最后就比不上球状微载体了。这时球状微载 体的优势就出来了，取样容易，观察细胞方便。
5、怎样分离纤维载体细胞：基本上在反应器里面是很难分离的，想像一下一个棉花团里有很多沙子，怎么样 把它分离出来。我知道的是以前有人把反应器盖子打开，把载体拿出来，胰酶消化，用移液管吹不下来，最后 用手搓。不过应该离心也可以出来一些，只要载体堆的不太厚。不过大型反应器我就不知道怎么取样了。

以上是我自己做过和朋友做过的一些经验和自己的一些看法，仅供参考。

dingyihe

不错的帖子，谢谢楼主无私的分享。