BL21是溶源菌吗？？？

lwdfjw

古木(279654552)  16:11:22
    有人在吗？？？请教大家一个问题。。BL21是溶源菌吗？？？我做发酵1000L的，OD长到3左右马上就掉下来了。。
老虎爱吃草(283948182)  16:15:07
BL21也有很多类型的
你用的是哪种？
很不正常
古木(279654552)  16:16:35
是啊。。我也不知道。。可能是PLYS的吧
老虎爱吃草(283948182)  16:16:51
你自己都不知道啊 我用的是DE3
古木(279654552)  16:17:41
是啊。。一般上罐三四个小时表现症状。。

老虎爱吃草(283948182)  16:18:10
我做5L不补料都能达到OD24
你做的也是重组菌生产蛋白吧
古木(279654552)  16:18:41
我以前做都OD都有长到40几的  是重组菌生产蛋白

老虎爱吃草(283948182)  16:19:32
莫非是种子活力不行了
重新克隆
古木(279654552)  16:20:04
重新转化了。。还是不行。。。

老虎爱吃草(283948182)  16:20:14
不会吧
老虎爱吃草(283948182)  16:20:32
你以前做过1000L吗？
古木(279654552)  16:20:54
想找一个除了BL21外的宿主菌。。好像没有
做过的。。。
老虎爱吃草(283948182)  16:21:36
一般宿主菌21的表达能力还是较强的 因为大家都用它

古木(279654552)  16:22:03
有点噬菌体的症状

老虎爱吃草(283948182)  16:22:38
你那发酵液是不是变清了？
OD迅速下降？

古木(279654552)  16:23:00
做大肠杆菌做到1000L的好像不多  是的  OD迅速下降
老虎爱吃草(283948182)  16:23:11
做到1000L的不多 不过我也做过500的

古木(279654552)  16:23:20
30分钟就没了

lwdfjw

老虎爱吃草(283948182)  16:23:34
那就是污染了

古木(279654552)  16:23:51
怎么弄都不正常。。。  消毒也没用。。。

老虎爱吃草(283948182)  16:24:00
一下子全没了
古木(279654552)  16:24:12
是啊。。

老虎爱吃草(283948182)  16:24:16
甲醛熏蒸 我是用这个方法解决的

古木(279654552)  16:24:33
不知道有没有人碰到过这种情况
我现在也在用。。

老虎爱吃草(283948182)  16:24:42
我就碰到过呢
古木(279654552)  16:24:51
甲醛熏蒸就好了？？？

老虎爱吃草(283948182)  16:25:05
不要急
没事的
不过大罐就有点难度了
我当时是5L罐

古木(279654552)  16:25:28
是每天都熏蒸吗？？？

老虎爱吃草(283948182)  16:25:35
就一次了 我是在学校

古木(279654552)  16:26:49
小罐不容易出现问题，。。
各方面好控制些

古木(279654552)  16:27:11
是啊  
我们种在摇床上都长的很好

老虎爱吃草(283948182)  16:28:14
那应该是污染了
古木(279654552)  16:28:17
到罐就有问题了。。。

zjb07

感谢分享，这都是很宝贵的经验

wanjunli

您好，可以分享一下经验吗？我也遇到了这个问题，出现构建重组菌还是一样的，平板培养的菌，菌落形态都不正常，周围有透明的一圈，好像噬菌斑。我该怎么办呢？谢谢

lwdfjw

wanjunli 发表于 2015-12-17 15:27
您好，可以分享一下经验吗？我也遇到了这个问题，出现构建重组菌还是一样的，平板培养的菌，菌落形态都不正 ...

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