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[工艺优化] 关于丝状真菌定量接种发酵的问题

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该用户从未签到

发表于 2010-7-10 11:57:51 | 显示全部楼层 |阅读模式
M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
我研究的真菌生长速度比较慢,且不产生孢子,现在想液体发酵研究其生长曲线
发现丝状真菌菌丝定量比较困难
文献中有两种方法,一种是取菌饼,另外一种是做菌丝悬浮液,但是不知道那一种更靠谱些?
总感觉菌丝悬浮液不均一,吸出来怕差别比较大。
去菌饼的话,好像没有文献这样做过。请专家给指导指导?
谢谢
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该用户从未签到

发表于 2010-7-13 15:53:04 | 显示全部楼层
对于丝状菌在发酵液中分布较球菌、杆菌等复杂
也会有交叉现象常用的OD在丝状菌定量上误差较大
所以单就定量来讲
可以选用干重法即取一定体积的发酵液在滤纸或离心管烘干称重

接种量的控制可以采用斜面或平板上挖块的方法
划线培养时控制固定的菌液稀释倍数和划线密度
挖块时挖固定表面积的琼脂块
连同琼脂一同放入发酵摇瓶中
这种方法相对简单准确

对于种子液接到发酵培养基中
一般接种发酵罐是整瓶种子接种事先可以用称重法
入种子液接摇瓶
只能将移液管或枪头的口剪大一点

个人操作习惯
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也请指教
谢谢

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该用户从未签到

发表于 2010-9-8 21:03:47 | 显示全部楼层
不知道你是用发酵罐做的还是用摇瓶做的?我们在用发酵罐做生长曲线的时候是测菌体湿重法,比如取30ml发酵液于离心管中8000转离心10min,然后弃上清称菌体湿重。

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