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发表于 2011-7-4 21:53:19
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实验步骤
一. 称取3.25g3,5-二硝基水杨酸溶于少量热蒸馏水中,溶后移入500ml容量瓶中,加入2 mol/l 的NaOH 162.5ml,再加入甘油22.5g,摇匀,能却后定容至500ml。
二. 乳糖标准溶液:准确称取干燥恒重的葡萄糖500mg ,加入少量的蒸馏水溶解后,移入250ml的容量瓶中定容至250ml,即为2.0mg/ml的糖。
三. 制作糖的标准曲线:
试管
编号 糖标准溶液
(ml) 纯净水
(ml) 糖的含量
(mg/ml) OD值
1 0 1 0
2 0.2 0.8 0.4
3 0.4 0.6 0.8
4 0.6 0.4 1.2
5 0.8 0.2 1.6
6 1 0 2
在上述试管中分别加入DNS试剂2.0ml,于沸水中加热2分钟进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水9.0ml,摇匀,在540nm波长处测定光吸收值。以糖的含量(mg/ml)为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。
测定糖浓度时,向1ml样品中加入2mlDNS试剂,于沸水中加热2分钟进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水9.0ml,摇匀,在540nm波长处测定光吸收值。测定后,取样品的光吸收值在标准曲线上查处相应的糖含量。 |
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