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离子交换层析是一种离子交换树脂作支持剂的层析法。
离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成聚苯乙烯-苯二乙烯等并不溶性高分子化合物。聚苯乙烯-苯二乙烯是由苯乙烯和苯二乙烯进行聚合和交联反应生成的具有网状结构的高聚物。它是离子交换树脂的基质,带电基团是通过后来的化学反应引入基质的。
阳离子交换树脂含有的酸性基团如-SO3H或-COOH可解离出H+离子,当溶液中含有
其他阳离子时,它们可以和H+发生交换而结合在树脂上。同样的阴离子交换树脂含有的碱性基团如-N(CH3)3OH或-NH3OH可解离出OH-,能和溶液里的阴离子,发生交换而结合在树脂上。
分离氨基酸混合物经常使用强酸型阳离子交换树脂。在交换柱中,树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液上柱。在PH2~3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上。氨基酸在树脂上结合的牢固程度即氨基酸与树脂碱的亲和力,主要决定于它们之间的经典吸引,其次是氨基酸侧链与树脂基质聚苯乙烯之间的疏水相互作用。在PH3左右,氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是碱性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸。因此氨基酸的洗脱顺序大体上是酸性氨基酸,中性氨基酸,最后是碱性氨基酸。 |
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