TA的每日心情 | 怒 2020-6-29 17:24 |
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签到天数: 20 天 连续签到: 1 天 [LV.4]偶尔看看III
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发表于 2012-4-22 10:25:05
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3发酵罐. F( u8 N. x9 l# @- u, g5 R% z' T
3.1发酵罐主体
: {( ~1 I2 o9 m% `* `3 F+ n25升,全不锈钢,无级电磁调速电机控制转速.温度显示.1 @( ?) K1 [( P" `8 Y
主要结构的注意事项:
7 [6 t4 ~* v1 m3 {0 H! V& H3 ` `搅拌器:最大转速1600 rpm,工作转速不得超过1200rpm,调转速时,要慢慢地从小调到大,不要一步到位.减速时,也要逐渐减小.
# f$ \1 [6 h( ~% F. t9 X夹套保温:有蒸汽入口或冷却水进口及相应的排料口.一般对于小型罐而言.主要是保温,故必须通入热水.现有水温自动调节装置一套.需预先设置好.
" h0 }- {/ q+ G0 M# L3 K& ]! l罐顶主要管口分布:接种口,空气出口(接流量计),其它接口./ e# K5 _0 b+ G
取样管:发酵液取样前和取样后,都要用蒸汽灭菌.先开启蒸汽发生器,当蒸汽发生器的压力升至0.4Mpa后,可开启蒸汽发生器出口外的阀门,同时注意位于发酵罐附近的压力表,该压力表的压力不得超过0.2Mpa.取样管蒸汽灭菌后,稍等一段时间,待取样管温度冷却,以免破坏发酵液中的成分,或热死活菌体.0 w& R& B2 R( M" x. ?7 s
3.2 操作$ m' l: U2 _. }7 d5 n8 d& y. [# S7 ` |& j
3.2.1 空罐灭菌:要将与罐体有关的管道及阀门都同时灭菌,尤其是管道死角的灭菌.: Y- [. A* _2 S$ j- ^: I, F) Q
3.2.2 实罐灭菌- K5 {/ f ^1 x9 _( [
实罐灭菌时加水量不要加得太满.因为蒸汽灭菌时,其冷凝水也有一定的数量,对于25升罐,加液量最大为16~17升.灭菌时,先夹套通入蒸汽,升温至90~95℃时,开始罐内直接蒸汽升温灭菌.达到规定温度后,保压30min,罐上压力保持0.1~O.15Mpa.灭菌时,先要稍许打开出气口,以便同时排气.3 }9 p4 C7 Z7 |2 Y0 ~7 r- \
注意事项:
% L& l& e" e& R) o* E* ~1 U(1)培养基加入后,要及时搅拌.防止结团,蒸汽灭菌时,更要搅拌,否则,培养基一旦在罐底部结团.就很难彻底灭菌.固态物料一般应在罐外配制好后再加入.
$ j( G6 \" i% p9 t" j& a) S(2)发酵罐为带压操作容器,当压力表显示罐内还有压力时.不得随意开启阀门,更不得旋动顶盖上的螺栓,以免罐内液体或蒸汽喷出.; U; c" E6 J( @
(3)灭菌完毕后,冷却时,罐内压力会逐渐下降,应注意罐内保压(调节无菌空气压力至0.03~0.05MPa以上),以免内部形成负压.
7 D# I" {/ u( u5 P" w3 R8 @1 m4 管道. M. k* H0 U+ a
本实验室的管道主要分为:7 d& w# l# x5 a5 k. P
蒸汽,压缩空气,无菌压缩空气,进水管,出水管和下水管,循环水管,都用不同的颜色加以区别.管道的连接方式有法兰连接,螺纹连接,没有焊接.请大家注意管道的布置.每人画一张管道及阀门的布置图.5 H/ t S! s* z4 u, J0 y
管道上的管件:阀门,法兰,弯头,小接管.学生要学会阀门的操作方法.9 B! l7 e+ ]$ a6 f: j& ?6 A
附录3 金属过滤器灭菌工作原理和操作过程* o4 Q- |1 P3 p# B+ Z" V/ P8 @ P+ y& n
1 金属过滤器工作原理, m' u: W7 r4 U5 |/ b* M
过滤介质为金属镍制成的含有极微孔径的过滤管,采用特种粉末冶金技术制成,外套不锈钢外壳.据厂商提供的数据,在空气除菌时,能去除的微粒直径为0.5微米,过滤效率99.999%.通风能力为2M3/min,过滤除菌效果较好.与金属过滤器配套的还有两个附件:预过滤器及蒸汽过滤器,其作用都是为了保护金属过滤器,因为金属过滤器的进气质量要求很高,较大直径的颗粒对过滤器有损害作用.进气压力不超过O.15MPa.进汽压力太高,将严重损坏金属过滤器.必须在进蒸汽前,将阀门调至半开位置.' F/ y6 x8 i3 w: z; u, Q
2 金属过滤器灭菌操作方法及注意事项9 ]0 b3 d0 {6 r
操作基本过程* p# E3 L; T5 w* T
蒸汽发生器的准备→阀门适当位置的安排→灭菌→排水→吹干
4 f4 z6 w; t' Y" \8 {- m/ f! i; B蒸汽发生器预先准备好之后,在进蒸汽之前,
4 |% o2 Y' m. o# r4 p) V. x4 I(1)半开金属过滤器底阀28,空气预过滤器底阀29,蒸汽预过滤器30球阀,打开金属过滤器顶阀24,金属过滤器出口阀25,发酵罐处总进汽截止阀21,棉花过滤器底阀17,空气中管阀18,发酵罐底部进汽阀9和发酵罐底阀12.. I: h9 x. q6 x$ ~4 c0 U
(2)关闭多功能空气过滤器总阀及出口阀19和20,棉花过滤器进汽阀16,空气灭菌用蒸汽管阀23,空气预过滤出气阀26,备用支管阀27,蒸汽过滤器总进汽阀3l,油水分离器阀32和33,蒸汽发生器出口总阀34,空气贮气管出口阀35.
, \. r8 n. l8 g6 f" b(3)当蒸汽压力达0.8Mpa之后,打开34总汽阀,控制进汽压力为0.2Mpa.6 }' K& [/ c1 @# E( q6 E
(4)打开蒸汽过滤器总进汽阀31,压力为0.15MPa以下.
/ {& K+ o4 u. R) |8 R7 e( t(5)五分钟后,关闭金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30及棉花过滤器底阀17.
2 ~& q6 ` u! s/ n9 E" A. N" ?, r: H(6)金属过滤器灭菌30分钟.! `( g$ n0 \8 C s3 B. U
(7)灭菌30分钟后,迅速关闭蒸汽过滤器总进汽阀3l,金属过滤器出口阀24.
# E e9 b- z E+ h(8)打开金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30阀,排去金属过滤器内的残余积水,降压.
6 C# `& i% @! a+ C. i: \3 J(9)打开蒸汽入口阀23,对管道再灭菌15分钟,其余在发酵罐处的17,18,2l,9,12阀不动.
; q" `# X/ B9 N" X# w+ ]- f(10)速启动压缩机,打开33阀,打开调压阀32.调压为0.05~01Mpa.
* M- l j/ h/ j! I( S2 ?& }: Y2 i(11)打开28阀或27阀,用压缩空气吹干金属过滤器,管道及棉花过滤器.) Y7 {' C. ]3 u/ E# ?" `0 T2 q
(12)5分钟后,关闭28,29,30排水阀,开始吹干管道.0 L9 o* o% U+ p
附录4 25升发酵罐系统的灭菌操作
5 B2 w( N# U; G: T' Z N发酵罐灭菌操作之前,请详细了解发酵罐及管道管件配置情况.) ~3 H2 x+ \9 W( ^
1 灭菌前的准备工作
5 K' ` m4 ?3 m0 W空罐灭菌操作步骤
3 k! P4 @: Z( j0 N(1)半打开发酵罐顶的排汽阀l,2;棉花过滤器底阀17,发酵罐放料阀12,2l;关闭进罐空气阀9,夹套进水阀7,夹套进汽阀3.打开排水阀8.
! k" C* U3 h" }# N+ \& p0 @9 |(2)全打开排料口阀10,铜阀D,11,取样口阀5,6,通入蒸汽.空罐灭菌,压力0.15~0.2MPa,5分钟后,关闭排料阀12,D,开始计算时间,灭菌30分钟.) M3 J8 k8 |6 W$ j& q3 X8 Y
(3)灭菌完毕后,发酵罐在密闭状态下降温降压,关闭取样口阀5,6:关闭排料口阀10,11,降压冷却至常压,准备实罐灭菌.- Z: T+ h9 l- m ?
2 实罐灭菌操作步骤
' e6 @8 O7 ^: U3 s& g(1)打开罐顶出汽阀1,2,使罐内压力为0,罐压不到0,绝对不允许旋开螺栓.打开加料口,加水,加料.加水量不要满罐,应留有余地,因为蒸汽加热时,有一定体积的冷凝水,如果是先夹套加热,加水量可适当多些.封上加料口,注意要旋紧适宜.启动搅拌电机,逐渐调节转速至150~200rpm." E) B; m, q' ^# `
(2)关闭夹套恒温水排水阀4,自来水进水阀7阀,打开夹套蒸汽进汽阀3,和冷凝水排入阀7,夹套通蒸汽加热到90-95℃.; F, q- I2 h8 j
(3)直接用蒸汽对罐内进行实罐灭菌,打开取样口阀5和蒸汽灭菌阀6,或打开排料口阀10,11,保压0.10~0.15MPa,温度120℃左右,灭菌30分钟左右(视情况而定).- r# ]& z. r: a; y
(4)实罐灭菌后,关闭13,5,6,2阀.% E1 f& i1 n7 {: E- x
(5)稍开启罐顶排汽阀l,压力为0.01~0.03 MPa后.速打开空气进阀9,关闭棉花过滤器底阀17,通入压缩空气,保压0.03~0.05MPa.
( I" `2 i+ j+ c& A(6)关闭夹套蒸汽阀3,和冷凝水排料阀8,排水阀14,开自来水进水阀13,循环水出口阀4,对培养基进行降温到所需温度.
1 J* d+ z( p# v4 H% K6 w7 r [(7)将空气流量计连接到罐顶阀1接管口处,保压到发酵所需压力;
, i; [# e% o) a$ Z" d3 发酵期间内取样方法+ S9 O/ G0 {7 ?
(1)打开蒸汽灭菌阀6和取样口阀门,打开总蒸汽阀门21,打开34阀,控制蒸汽压力保持在0.2MPa通蒸汽灭菌;2分钟后,迅速关闭6阀,打开5阀,取样.- ]9 D7 b" a5 A, f
(2)取样后,关闭取样管出料阀5,打开蒸汽进汽阀6,通蒸汽灭菌2分钟,关闭21,6阀和取样口阀门.. k, T: `: X6 Q3 f I* |8 K9 }: {- K
(3)注意卫生,每次取样后,自觉清洗操作台.取样前,可用三角瓶.先洗涤三角瓶,洗瓶用的发酵液不得随意倾倒.& P) N+ D B* G. X
4 意外事故的处理% y2 z B9 @% b
突然停电时,此时由于搅拌已停止.但空气贮罐中的压力仍较高,此时,应立即关闭出气阀,进行保压操作,本实验室的空气贮罐最多能维持1.5小时.& s5 Y' g3 W* V; `4 c
5 发酵罐结束排料
" s% Z& J/ R9 l, x% d3 u! }" q发酵罐结束排料时,应关闭进气阀,停止进气,待罐压降至常压后,将罐顶的出气阀打开,才能打开罐底阀门排料,否则料液无法排出.
. f) L( \! E& J6 ]; n6 通风发酵实验室符号及标记
1 r* N/ E1 F6 U1 L+ G) d管道标志:4 c/ Z( u& n6 @; W- c( a; D% q) K# d9 h
红色:蒸汽;黄色:压缩空气;
$ z0 g3 }! G0 v" j; F& ^绿色:进水管;黑色:冷却排水.
/ F0 Y g3 s! G发酵罐共有四套,每套发酵罐体的阀门的排布方式及编号均相同 |
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