TA的每日心情 | 怒 2020-6-29 17:24 |
|---|
签到天数: 20 天 连续签到: 1 天 [LV.4]偶尔看看III
|

楼主 |
发表于 2012-4-22 10:25:05
|
显示全部楼层
3发酵罐
) G! K" `% _% _3.1发酵罐主体0 [! s9 T6 f. v: d7 ~
25升,全不锈钢,无级电磁调速电机控制转速.温度显示.
X5 y( K5 ~% \7 f" j主要结构的注意事项:* Z- |4 X6 C' L4 ?3 O
搅拌器:最大转速1600 rpm,工作转速不得超过1200rpm,调转速时,要慢慢地从小调到大,不要一步到位.减速时,也要逐渐减小.
/ ~1 \% Y3 y. I* h夹套保温:有蒸汽入口或冷却水进口及相应的排料口.一般对于小型罐而言.主要是保温,故必须通入热水.现有水温自动调节装置一套.需预先设置好. X1 G. ]9 x- u# C/ \: ]
罐顶主要管口分布:接种口,空气出口(接流量计),其它接口.
) A; l. r9 L8 X取样管:发酵液取样前和取样后,都要用蒸汽灭菌.先开启蒸汽发生器,当蒸汽发生器的压力升至0.4Mpa后,可开启蒸汽发生器出口外的阀门,同时注意位于发酵罐附近的压力表,该压力表的压力不得超过0.2Mpa.取样管蒸汽灭菌后,稍等一段时间,待取样管温度冷却,以免破坏发酵液中的成分,或热死活菌体.
7 f! w( S" T8 e3.2 操作
' r4 h5 }( l" G) Q3.2.1 空罐灭菌:要将与罐体有关的管道及阀门都同时灭菌,尤其是管道死角的灭菌.+ i7 ~( I: J, g
3.2.2 实罐灭菌
4 {# c3 {3 `! @实罐灭菌时加水量不要加得太满.因为蒸汽灭菌时,其冷凝水也有一定的数量,对于25升罐,加液量最大为16~17升.灭菌时,先夹套通入蒸汽,升温至90~95℃时,开始罐内直接蒸汽升温灭菌.达到规定温度后,保压30min,罐上压力保持0.1~O.15Mpa.灭菌时,先要稍许打开出气口,以便同时排气.
; B4 b9 a6 l3 | e1 Q注意事项:
. V" J* Q+ s* r# G* l3 `8 r(1)培养基加入后,要及时搅拌.防止结团,蒸汽灭菌时,更要搅拌,否则,培养基一旦在罐底部结团.就很难彻底灭菌.固态物料一般应在罐外配制好后再加入.
3 R4 s; q; N" l. H( x8 c0 G(2)发酵罐为带压操作容器,当压力表显示罐内还有压力时.不得随意开启阀门,更不得旋动顶盖上的螺栓,以免罐内液体或蒸汽喷出.1 o5 @. R- m E( E5 k" `! L
(3)灭菌完毕后,冷却时,罐内压力会逐渐下降,应注意罐内保压(调节无菌空气压力至0.03~0.05MPa以上),以免内部形成负压.
# x9 d$ A$ @) o8 T5 R0 a1 I4 管道- T( r% v! @5 a- [! G+ b1 Z8 i/ L
本实验室的管道主要分为:
" s; @7 m. g( h& Y. ^9 N3 N' S; `蒸汽,压缩空气,无菌压缩空气,进水管,出水管和下水管,循环水管,都用不同的颜色加以区别.管道的连接方式有法兰连接,螺纹连接,没有焊接.请大家注意管道的布置.每人画一张管道及阀门的布置图.
6 t) s/ C5 M+ a. _5 P$ C6 i0 \管道上的管件:阀门,法兰,弯头,小接管.学生要学会阀门的操作方法.
# f0 B& e; r0 X3 s附录3 金属过滤器灭菌工作原理和操作过程* r' |9 L1 v" l. G0 o8 @1 {
1 金属过滤器工作原理
! G3 F& |3 e/ r过滤介质为金属镍制成的含有极微孔径的过滤管,采用特种粉末冶金技术制成,外套不锈钢外壳.据厂商提供的数据,在空气除菌时,能去除的微粒直径为0.5微米,过滤效率99.999%.通风能力为2M3/min,过滤除菌效果较好.与金属过滤器配套的还有两个附件:预过滤器及蒸汽过滤器,其作用都是为了保护金属过滤器,因为金属过滤器的进气质量要求很高,较大直径的颗粒对过滤器有损害作用.进气压力不超过O.15MPa.进汽压力太高,将严重损坏金属过滤器.必须在进蒸汽前,将阀门调至半开位置.5 W4 v" P1 P0 X( B
2 金属过滤器灭菌操作方法及注意事项; J' A9 {0 {, y* Y; Q) s* }: @: h/ A6 y
操作基本过程
+ e- P# s6 }+ [( F8 L蒸汽发生器的准备→阀门适当位置的安排→灭菌→排水→吹干
8 P$ \* U! n: U$ F蒸汽发生器预先准备好之后,在进蒸汽之前,% O+ O6 o6 J4 @* l. Z9 Q
(1)半开金属过滤器底阀28,空气预过滤器底阀29,蒸汽预过滤器30球阀,打开金属过滤器顶阀24,金属过滤器出口阀25,发酵罐处总进汽截止阀21,棉花过滤器底阀17,空气中管阀18,发酵罐底部进汽阀9和发酵罐底阀12.
/ N( V! c" b: l% t4 }8 v8 w7 C' n(2)关闭多功能空气过滤器总阀及出口阀19和20,棉花过滤器进汽阀16,空气灭菌用蒸汽管阀23,空气预过滤出气阀26,备用支管阀27,蒸汽过滤器总进汽阀3l,油水分离器阀32和33,蒸汽发生器出口总阀34,空气贮气管出口阀35.
$ q8 M' n4 \4 f) S(3)当蒸汽压力达0.8Mpa之后,打开34总汽阀,控制进汽压力为0.2Mpa.
5 w6 Z* D% {% e(4)打开蒸汽过滤器总进汽阀31,压力为0.15MPa以下.
- b" s5 h. m* Q# x(5)五分钟后,关闭金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30及棉花过滤器底阀17.
' F3 l$ @- R9 t ]/ b4 [4 o' w(6)金属过滤器灭菌30分钟.
2 K" O/ Q; H* P7 f7 q; a# P(7)灭菌30分钟后,迅速关闭蒸汽过滤器总进汽阀3l,金属过滤器出口阀24., S# N0 t( f& I$ N5 r: o3 {. g
(8)打开金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30阀,排去金属过滤器内的残余积水,降压.
% k! S- R3 B7 U) p; D6 D(9)打开蒸汽入口阀23,对管道再灭菌15分钟,其余在发酵罐处的17,18,2l,9,12阀不动.# ]6 }# U2 c, [% |% g! }5 y- y
(10)速启动压缩机,打开33阀,打开调压阀32.调压为0.05~01Mpa.
8 ~! U! {; P; Q! {% P% h(11)打开28阀或27阀,用压缩空气吹干金属过滤器,管道及棉花过滤器.
: I* E' I/ P7 F7 g) X3 f) Z" u(12)5分钟后,关闭28,29,30排水阀,开始吹干管道.
# h( l& B9 C2 ]4 t; H. C附录4 25升发酵罐系统的灭菌操作" p. ], l! G# E5 r8 T: J: q
发酵罐灭菌操作之前,请详细了解发酵罐及管道管件配置情况.
$ Q U& I6 F/ U8 C) T. I1 灭菌前的准备工作
: [0 q; X9 o- a, @2 y# S$ B6 N/ N, V空罐灭菌操作步骤
. ~0 ]: W* s% R3 A(1)半打开发酵罐顶的排汽阀l,2;棉花过滤器底阀17,发酵罐放料阀12,2l;关闭进罐空气阀9,夹套进水阀7,夹套进汽阀3.打开排水阀8.
% E' U9 H* c0 W(2)全打开排料口阀10,铜阀D,11,取样口阀5,6,通入蒸汽.空罐灭菌,压力0.15~0.2MPa,5分钟后,关闭排料阀12,D,开始计算时间,灭菌30分钟.+ @0 H7 y0 I# G6 X. Y7 h; {9 O% k
(3)灭菌完毕后,发酵罐在密闭状态下降温降压,关闭取样口阀5,6:关闭排料口阀10,11,降压冷却至常压,准备实罐灭菌.
1 n' P! O& L7 Z. P# I: m* m2 实罐灭菌操作步骤
- Z$ Q* S9 H7 ?$ I(1)打开罐顶出汽阀1,2,使罐内压力为0,罐压不到0,绝对不允许旋开螺栓.打开加料口,加水,加料.加水量不要满罐,应留有余地,因为蒸汽加热时,有一定体积的冷凝水,如果是先夹套加热,加水量可适当多些.封上加料口,注意要旋紧适宜.启动搅拌电机,逐渐调节转速至150~200rpm.
7 S" \* S$ k# Q& \(2)关闭夹套恒温水排水阀4,自来水进水阀7阀,打开夹套蒸汽进汽阀3,和冷凝水排入阀7,夹套通蒸汽加热到90-95℃.- n* L9 G g% g! L. b
(3)直接用蒸汽对罐内进行实罐灭菌,打开取样口阀5和蒸汽灭菌阀6,或打开排料口阀10,11,保压0.10~0.15MPa,温度120℃左右,灭菌30分钟左右(视情况而定).# r) p, P# B, s2 L' N
(4)实罐灭菌后,关闭13,5,6,2阀.
6 w- ]7 @( o. D- V, Y V(5)稍开启罐顶排汽阀l,压力为0.01~0.03 MPa后.速打开空气进阀9,关闭棉花过滤器底阀17,通入压缩空气,保压0.03~0.05MPa.' a) t2 m, n0 x9 i
(6)关闭夹套蒸汽阀3,和冷凝水排料阀8,排水阀14,开自来水进水阀13,循环水出口阀4,对培养基进行降温到所需温度.& D. P2 U1 S$ w$ B
(7)将空气流量计连接到罐顶阀1接管口处,保压到发酵所需压力;
8 f8 g" r& q" J& L3 发酵期间内取样方法
* F; e3 M& F! o2 k(1)打开蒸汽灭菌阀6和取样口阀门,打开总蒸汽阀门21,打开34阀,控制蒸汽压力保持在0.2MPa通蒸汽灭菌;2分钟后,迅速关闭6阀,打开5阀,取样.1 i% s- b7 r$ z8 m
(2)取样后,关闭取样管出料阀5,打开蒸汽进汽阀6,通蒸汽灭菌2分钟,关闭21,6阀和取样口阀门.& F5 l, K' }) ]. R5 C
(3)注意卫生,每次取样后,自觉清洗操作台.取样前,可用三角瓶.先洗涤三角瓶,洗瓶用的发酵液不得随意倾倒. [$ M8 O z- j# W X: k
4 意外事故的处理* A& I4 }# u0 U
突然停电时,此时由于搅拌已停止.但空气贮罐中的压力仍较高,此时,应立即关闭出气阀,进行保压操作,本实验室的空气贮罐最多能维持1.5小时.9 d r6 T) c; Y0 C% J$ h, E+ }
5 发酵罐结束排料
7 j l1 x. u5 x" o5 V( V发酵罐结束排料时,应关闭进气阀,停止进气,待罐压降至常压后,将罐顶的出气阀打开,才能打开罐底阀门排料,否则料液无法排出.
7 T: P% U2 x) E" u6 通风发酵实验室符号及标记
; B) m0 I& k: d, [管道标志:4 N& T+ \5 U% l, }' x3 ^, e
红色:蒸汽;黄色:压缩空气;% h: `% g* L% W0 _2 o4 W# I
绿色:进水管;黑色:冷却排水.
, M) j9 T+ h$ w; q1 I发酵罐共有四套,每套发酵罐体的阀门的排布方式及编号均相同 |
|