TA的每日心情 | 怒
2020-6-29 17:24 |
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发表于 2012-4-22 10:25:05
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3发酵罐
. i: e- V7 n6 |/ l3.1发酵罐主体
/ |8 H. k# Q8 g" k, n4 e25升,全不锈钢,无级电磁调速电机控制转速.温度显示.
9 u* E# X7 H3 f9 B) s1 L主要结构的注意事项:( A- |$ p8 k' A- ]7 c
搅拌器:最大转速1600 rpm,工作转速不得超过1200rpm,调转速时,要慢慢地从小调到大,不要一步到位.减速时,也要逐渐减小.2 Z& i+ W8 [! W, Y0 W2 |5 o
夹套保温:有蒸汽入口或冷却水进口及相应的排料口.一般对于小型罐而言.主要是保温,故必须通入热水.现有水温自动调节装置一套.需预先设置好.: d5 N: M3 d+ n& M- }
罐顶主要管口分布:接种口,空气出口(接流量计),其它接口.; o E+ T% s3 h8 n4 Y5 ~' w
取样管:发酵液取样前和取样后,都要用蒸汽灭菌.先开启蒸汽发生器,当蒸汽发生器的压力升至0.4Mpa后,可开启蒸汽发生器出口外的阀门,同时注意位于发酵罐附近的压力表,该压力表的压力不得超过0.2Mpa.取样管蒸汽灭菌后,稍等一段时间,待取样管温度冷却,以免破坏发酵液中的成分,或热死活菌体.
" {! B0 n8 h" c& c1 H' Z# V3.2 操作! _% A3 G* A! X
3.2.1 空罐灭菌:要将与罐体有关的管道及阀门都同时灭菌,尤其是管道死角的灭菌.! f6 A! j: X4 l
3.2.2 实罐灭菌
' Y' P! |8 I0 g! ^实罐灭菌时加水量不要加得太满.因为蒸汽灭菌时,其冷凝水也有一定的数量,对于25升罐,加液量最大为16~17升.灭菌时,先夹套通入蒸汽,升温至90~95℃时,开始罐内直接蒸汽升温灭菌.达到规定温度后,保压30min,罐上压力保持0.1~O.15Mpa.灭菌时,先要稍许打开出气口,以便同时排气.
5 Q/ u' c" a% ^5 F- q. a1 O$ }注意事项:
n4 |) R+ p$ J* K! _+ @(1)培养基加入后,要及时搅拌.防止结团,蒸汽灭菌时,更要搅拌,否则,培养基一旦在罐底部结团.就很难彻底灭菌.固态物料一般应在罐外配制好后再加入.7 q: v5 ^! u/ ^1 t" m J& L* B S
(2)发酵罐为带压操作容器,当压力表显示罐内还有压力时.不得随意开启阀门,更不得旋动顶盖上的螺栓,以免罐内液体或蒸汽喷出.
% o+ y. _+ b% [( U(3)灭菌完毕后,冷却时,罐内压力会逐渐下降,应注意罐内保压(调节无菌空气压力至0.03~0.05MPa以上),以免内部形成负压.* R+ ~ R7 z/ G% ^2 F% k& b% D3 |4 ~
4 管道' X/ r3 o# f, o$ T$ I
本实验室的管道主要分为:
& |& D3 r1 g1 g* |2 X蒸汽,压缩空气,无菌压缩空气,进水管,出水管和下水管,循环水管,都用不同的颜色加以区别.管道的连接方式有法兰连接,螺纹连接,没有焊接.请大家注意管道的布置.每人画一张管道及阀门的布置图.
9 ]- e% b: ]* R管道上的管件:阀门,法兰,弯头,小接管.学生要学会阀门的操作方法.9 V9 z7 s0 A$ r0 V% h4 h _
附录3 金属过滤器灭菌工作原理和操作过程' {& L* n9 Z0 ?9 l
1 金属过滤器工作原理' t: J3 t" V3 y2 @3 l
过滤介质为金属镍制成的含有极微孔径的过滤管,采用特种粉末冶金技术制成,外套不锈钢外壳.据厂商提供的数据,在空气除菌时,能去除的微粒直径为0.5微米,过滤效率99.999%.通风能力为2M3/min,过滤除菌效果较好.与金属过滤器配套的还有两个附件:预过滤器及蒸汽过滤器,其作用都是为了保护金属过滤器,因为金属过滤器的进气质量要求很高,较大直径的颗粒对过滤器有损害作用.进气压力不超过O.15MPa.进汽压力太高,将严重损坏金属过滤器.必须在进蒸汽前,将阀门调至半开位置.
_* @$ Z; }: g( N) G& A2 金属过滤器灭菌操作方法及注意事项+ T7 B) i( ~! A* l+ I# j
操作基本过程' p3 m1 d# r" W9 H1 g
蒸汽发生器的准备→阀门适当位置的安排→灭菌→排水→吹干
5 U) q) ~, }" L+ m* o: r& n4 V% E蒸汽发生器预先准备好之后,在进蒸汽之前,: p t7 Q. M5 Z# {( S" j, r6 l& x
(1)半开金属过滤器底阀28,空气预过滤器底阀29,蒸汽预过滤器30球阀,打开金属过滤器顶阀24,金属过滤器出口阀25,发酵罐处总进汽截止阀21,棉花过滤器底阀17,空气中管阀18,发酵罐底部进汽阀9和发酵罐底阀12.
1 K" l( W9 M$ q( D: K/ R(2)关闭多功能空气过滤器总阀及出口阀19和20,棉花过滤器进汽阀16,空气灭菌用蒸汽管阀23,空气预过滤出气阀26,备用支管阀27,蒸汽过滤器总进汽阀3l,油水分离器阀32和33,蒸汽发生器出口总阀34,空气贮气管出口阀35.
- O) O9 h4 g7 u# n0 a(3)当蒸汽压力达0.8Mpa之后,打开34总汽阀,控制进汽压力为0.2Mpa.2 O, }2 Z- e: k: ~! t( ]% M
(4)打开蒸汽过滤器总进汽阀31,压力为0.15MPa以下.: J" x) [ P7 ~
(5)五分钟后,关闭金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30及棉花过滤器底阀17.
c8 ]6 W" B1 k' S4 s(6)金属过滤器灭菌30分钟.
+ h- t+ U I9 z+ y, [& I(7)灭菌30分钟后,迅速关闭蒸汽过滤器总进汽阀3l,金属过滤器出口阀24.
3 c) z+ Y7 c2 E1 @, @' I$ P(8)打开金属过滤器及附属过滤器的底阀28,29,30阀,排去金属过滤器内的残余积水,降压.
- Y8 o+ s: h; `8 l1 [( z3 h0 G(9)打开蒸汽入口阀23,对管道再灭菌15分钟,其余在发酵罐处的17,18,2l,9,12阀不动.
% M" @! _- d) {2 y( @7 T5 t(10)速启动压缩机,打开33阀,打开调压阀32.调压为0.05~01Mpa.
: s4 e1 W& E$ } ]% y" @* ^. t b(11)打开28阀或27阀,用压缩空气吹干金属过滤器,管道及棉花过滤器.3 F) h/ M7 \# E
(12)5分钟后,关闭28,29,30排水阀,开始吹干管道.
x0 A! o) @& D+ q6 {& Q# }( K附录4 25升发酵罐系统的灭菌操作
l8 V( h P5 s0 f发酵罐灭菌操作之前,请详细了解发酵罐及管道管件配置情况.
2 x; X& [) C% P. g- X1 灭菌前的准备工作/ f- P7 c4 y# r+ G' M
空罐灭菌操作步骤1 g/ d% m ]8 q5 W
(1)半打开发酵罐顶的排汽阀l,2;棉花过滤器底阀17,发酵罐放料阀12,2l;关闭进罐空气阀9,夹套进水阀7,夹套进汽阀3.打开排水阀8.( {) P" C" f7 R, Y; j
(2)全打开排料口阀10,铜阀D,11,取样口阀5,6,通入蒸汽.空罐灭菌,压力0.15~0.2MPa,5分钟后,关闭排料阀12,D,开始计算时间,灭菌30分钟.
8 _1 h" ^% U' y* U$ H(3)灭菌完毕后,发酵罐在密闭状态下降温降压,关闭取样口阀5,6:关闭排料口阀10,11,降压冷却至常压,准备实罐灭菌.! g w' q0 ~% o" }! o
2 实罐灭菌操作步骤
& S8 V' @2 T8 p4 ](1)打开罐顶出汽阀1,2,使罐内压力为0,罐压不到0,绝对不允许旋开螺栓.打开加料口,加水,加料.加水量不要满罐,应留有余地,因为蒸汽加热时,有一定体积的冷凝水,如果是先夹套加热,加水量可适当多些.封上加料口,注意要旋紧适宜.启动搅拌电机,逐渐调节转速至150~200rpm.
) u& |; I( l! W) B# Q: m(2)关闭夹套恒温水排水阀4,自来水进水阀7阀,打开夹套蒸汽进汽阀3,和冷凝水排入阀7,夹套通蒸汽加热到90-95℃.7 u$ O) x& R; A" }9 B* O
(3)直接用蒸汽对罐内进行实罐灭菌,打开取样口阀5和蒸汽灭菌阀6,或打开排料口阀10,11,保压0.10~0.15MPa,温度120℃左右,灭菌30分钟左右(视情况而定).
5 c( `5 j6 p8 ?8 C(4)实罐灭菌后,关闭13,5,6,2阀.8 Q9 m1 `9 P! |& s5 o$ B
(5)稍开启罐顶排汽阀l,压力为0.01~0.03 MPa后.速打开空气进阀9,关闭棉花过滤器底阀17,通入压缩空气,保压0.03~0.05MPa.
9 S# f* Q0 U; A0 Z, B5 O8 L, H(6)关闭夹套蒸汽阀3,和冷凝水排料阀8,排水阀14,开自来水进水阀13,循环水出口阀4,对培养基进行降温到所需温度.
8 s. k# A# [% T8 b! x. X0 p(7)将空气流量计连接到罐顶阀1接管口处,保压到发酵所需压力;, o6 W. }2 t* L" j
3 发酵期间内取样方法
. ^3 O& ^" e i( N8 a- N; f5 O+ _# v* J(1)打开蒸汽灭菌阀6和取样口阀门,打开总蒸汽阀门21,打开34阀,控制蒸汽压力保持在0.2MPa通蒸汽灭菌;2分钟后,迅速关闭6阀,打开5阀,取样.- g& }# f6 K" M8 f) ?3 U" g2 U
(2)取样后,关闭取样管出料阀5,打开蒸汽进汽阀6,通蒸汽灭菌2分钟,关闭21,6阀和取样口阀门.
( ?" B5 ~+ G0 o# k3 t+ {0 h(3)注意卫生,每次取样后,自觉清洗操作台.取样前,可用三角瓶.先洗涤三角瓶,洗瓶用的发酵液不得随意倾倒.! U. Q4 {, e0 o; `# Q
4 意外事故的处理& I& b1 P; R: t; ?3 v& y- W) c# t7 A
突然停电时,此时由于搅拌已停止.但空气贮罐中的压力仍较高,此时,应立即关闭出气阀,进行保压操作,本实验室的空气贮罐最多能维持1.5小时.6 w5 O, }) F6 y
5 发酵罐结束排料
" W* a3 p: a T5 b2 Z发酵罐结束排料时,应关闭进气阀,停止进气,待罐压降至常压后,将罐顶的出气阀打开,才能打开罐底阀门排料,否则料液无法排出.) m S+ x" o) l( T
6 通风发酵实验室符号及标记
: l& c/ {' N$ [1 P, R$ f! @管道标志:
4 F" o9 P' B! x7 x# M' u6 t4 q红色:蒸汽;黄色:压缩空气;
4 r5 b, l) P8 z; E9 b绿色:进水管;黑色:冷却排水.7 @6 `* K3 G1 G q9 ?4 v
发酵罐共有四套,每套发酵罐体的阀门的排布方式及编号均相同 |
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发表于 2012-4-22 10:24:43
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