如何处理在发酵试验中摇瓶供氧差导致实验失败的问题

gl19860312

摇瓶发酵培养是生物发酵工艺小试以及菌种扩培的主要方式。特别在微生物发酵中，小试都是用摇瓶培养的，这样的话，一个可以节约原料和菌种，二，也可以更好的观察反应情况以及对培养条件进行调整，并且，有利于做正交等对比实验。   但是摇瓶与在发酵罐中进行微生物培养时有很多参数存在较大差异，比如流体状态、通氧状态，而且上述两个状态的差异对于发酵时的微生物所需的氧气供应与利用有着很大的影响，因此对于好氧类生物发酵实验来说，实验室摇瓶小试与发酵罐的实验结果往往存在很大差异。   在酵母浸出物的推广中，发现很多客户受困于摇瓶实验结果与发酵罐实验结果存在巨大差异的问题，但是另外一些客户比较有经验，对这类问题解决的很好，我们通过与客户的交流也受益良多。   对于好氧类型的摇瓶实验，改善供氧大概有下面一些措施。
一、用带档板的三角瓶代替普通三角瓶。带档板的三角瓶的确贵一些，但是对于实验的准确性很有好处，挡板的存在可以使发酵液的流体状态更好的模拟发酵罐中的流体状态，有利于氧气在发酵液中的分布以及微生物的利用；据天津科技大学的实验结果，带挡板的三角瓶具有较高的溶氧性能,在回转式摇瓶柜上利用冷膜法进行测定,当装液量在30～50 mL时其溶氧系数(K_(la))可达1.20～1.80 L/h,比普通三角瓶提高2倍左右。应用于好气性微生物培养,溶氧水平有明显提高。
二、如果不使用带档板的摇瓶，可以在发酵液中加些玻璃珠或者其他惰性材料、不锈钢弹簧(非不锈钢材料易生锈干扰发酵结论)，但是这种方式对摇瓶的磨损很大，三角瓶用几次以后底部就不透明了，振荡力度过大也容易对三角瓶造成损害，所以说这类方式可以应急，长期看的话其费效比好不如带档板的三角瓶好。
三、将三角瓶与外界隔绝的棉塞改成纱布，棉塞里面的棉花充填比较致密，用久了透气性更加糟糕，就算采用挡板三角瓶，氧气进来不通畅，就算改善了发酵液流体状态也是白搭，根本满足不了某些好氧微生物的氧气需求。纱布的层数根据实际情况可以调整，一般用8层，但是也可以根据实际情况酌减。几个注意事项:     挡板摇瓶的装液量不可过高，不超过10%为好，氧气供应改善后微生物代谢加快，加上流体运动比较剧烈，特别容易产泡，在使用玉米浆、豆饼水解液等有机氮源时更是如此。
用纱布代替棉塞的确容易导致摇瓶时的杂菌污染风险加大，容易导致实验失败，但是这个风险可以通过精心操作、环境消毒来避免，而且为了得到真实的实验结果，这个风险值得冒，毕竟摇瓶失败后的损失也不大。所以可以通过多上几组摇瓶对照来保证足够的成功率。我们有些客户曾经只用四层纱布封口，实验照样取得成功，而且认为四层纱布封口是实验成功的一个关键因素，因为当墨守成规用八层纱布时，实验结果并不理想。

xiangchengmeng

增加摇床转速

gl19860312

增加摇床转速
xiangchengmeng 发表于 2012-5-8 08:32

    在一定范围内增加转速是可以的
上面讲了好几个方法

gx0406

这些方法我们一直在用了，完全一样！