不产芽孢

winds_07

小试、中试都能正常产芽孢，到生产发酵罐就自溶不产孢了，产品为芽孢，培养基都是一样的。在小试上模拟到生产罐也不行，推测传代导致。该菌在同样的培方下曾经成功过。也有采用高温、低温、流加硫酸锰、向上调pH等手段调控，均无作用。请问各位同行大虾有好的解决办法和建议吗？非常感谢！

lwdfjw

瞰天下(444723253)  10:00:04
不同菌种 不同情况 但中试能成功 所以培养基方面没问题 生产控制上的问题可能性最大

中试工艺参数不可能完全照搬到生产上  如果刚看中试参数 不根据菌体生长状态改变控制 适应菌体营养要求 出问题是肯定的

赵工(837026809)  9:52:35
是不是传代造成的，可以在中试罐多培养一级试试啊。我觉得应该是生产发酵条件不合适造成的。

jilsfh

觉得问题好笑：（可排除因素:         可排除培养基、通气、噬菌体等因素），您怎么能确定排除这些问题？？？
发酵放大到目前为止还没有准确的理论知识的，最好的资料也只是提到从某方面出发进行大致放大，然后逐步调整。
1，培养基，大部分稳定发酵的发酵液和种子培养基区别都比较大的，考虑的因素也多：PH，某些离子的含量等等。
2，通气，发酵大罐如果比较大，通气特别是问题，不能简单的按比例扩大通气量，还有搅拌，发酵液成分等产生的实际溶氧问题的。
3，噬菌体，特别难找的问题，如果自溶，很大可能是噬菌体了！！也特别难解决。（碰到过染噬菌体，怎么取样检测都找不到，而且取样菌种室培养不自溶，就是在罐里面自溶，后来按照噬菌体的解决办法逐步好转）
按照您的问题，很多可能都是有的，总体就是：你的大罐条件不好，菌体生长不是很强壮，所以容易染噬菌体自溶！！！
可行的解决：
1，加强噬菌体防护：从周围环境到车间都加强消毒和传染预防。
2，适当调整配方，培养环境，如果在大罐调整成本高，可考虑实验室模拟，实验室做种子罐，小试罐做中试罐，中试罐当做发酵罐。多调整几种培养环境，力争找到最差环境和最优环境的数据。比如：最高PH和最低PH值，最高溶氧和最低溶氧，最高硫离子含量和最低硫离子含量等等，也就是这样的范围菌种还能保证生长不受大的影响。以后大罐调整就在这个范围内。不过发酵是多因素影响，比如：PH不好，不过通气和培养基条件好，可能也会生长得好，所以记得多因素平行分析。

具体解决的时候，有问题到QQ群63672856 上面探讨@@@@

winds_07

jilsfh 发表于 2013-4-2 13:45
觉得问题好笑：（可排除因素:         可排除培养基、通气、噬菌体等因素），您怎么能确定排除这些问题？？？
发酵 ...

该菌种前期是用氮气保压的，由于发酵过程会产氢气，种子长起来是不通气的，只放气。该菌种曾经成功大生产过半年，能够转入大生产罐并产孢。后来由于市场原因暂停，后面就出现了上述问题，在几吨级的二级罐中不产孢。我之所以说能排除是因为这边的技术员和工程师已经做过一些工作，确定可以排除。

winds_07

lwdfjw 发表于 2013-4-2 12:26
瞰天下(444723253)  10:00:04
不同菌种 不同情况 但中试能成功 所以培养基方面没问题 生产控制上的问题可能 ...

感谢回复！该菌以前是可以正常生产的。现在这边的技术员和工程师正在从几个方面寻找原因和想办法。。。

winds_07

winds_07 发表于 2013-4-2 20:02
感谢回复！该菌以前是可以正常生产的。现在这边的技术员和工程师正在从几个方面寻找原因和想办法。。。

该菌培养基成本很高，大规模试验有些得不偿失。

ljlweiyi

厌氧度不够吗？流加的是根据什么参数控制？

hyaline

依微生物學原理，G+菌碰到逆境時會產孢。但樓主的說明中，控溫、控酸鹼值、加硫酸錳皆無法產孢，或許是逆境不夠嚴重，可以延長逆境的時間試試看。