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[求助] BL21加入IPTG诱导后发现大肠杆菌不生长了

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yxylmr

该用户从未签到
发表于 2014-3-12 16:06:28 | 显示全部楼层 |阅读模式
M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
论坛yxylmr( ) 9:45:19
BL21  加入IPTG诱导后发现大肠杆菌不生长了  但是一直在消耗葡萄糖
高手指点下啊

IPTG 浓度1 mm 温度37度
之前摇瓶的时候用的是1 mm

加IPTG后   补料一直在消耗  但是OD和湿重没有增加
IPTG, 诱导, 大肠杆菌, 葡萄糖

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wuhuawei

该用户从未签到
发表于 2014-3-12 16:07:14 | 显示全部楼层
论坛wuhuawei( ) 9:45:53
降低浓度 你的太高了
0.1-0.5之间选择

IPTG对细胞有点毒性，第二，IPTG加了后，重组蛋白大量表达，细胞生长几乎停止

细胞内的原料机会全部用来合成重组蛋白

诱导的时候可以降低温度到30度

细胞不仅更稳定，而且不溶性蛋白会大大降低
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