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噬菌体爆发及应对措施

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  • TA的每日心情
    擦汗
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    [LV.10]以坛为家III

    发表于 2009-3-2 22:25:25 | 显示全部楼层 |阅读模式
    M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
    来源:丁香园
    我们做的是大肠杆菌的基因工程菌。前段时间连着三批都感染了噬菌体,每天一批,我们做的是60T发酵罐。

    噬菌体爆发迹象:

    1、PH一直回升,会比较高(我们正常是7.00,回升到7.8)。

    2、DO也很快回升,会上升到130%多。

    3、发酵液变稀,OD值很快下降。

    4、镜检看不到任何菌体。

    5、爆发的时间一次比一次提前,都是发酵前期。

    噬菌体爆发的速度很快,也就那么30分钟左右,当时我们刚刚移种也就那么发酵周期3~5h,太可怕了;你 想正常的发酵罐也就那么30分钟,一下子全部都没有了;

    爆发之后全厂进行漂白粉喷洒,新洁尔灭喷洒,甲醛熏蒸;连续几天每天都是做卫生;

    个人观点:
    噬菌体爆发原因分析

    1、当时车间更换了新的领导,没有对于环境卫生给予重视;

    2、当时车间也进行改造,卫生只是稍微做,连续有4个月;

    3、车间改造,把消毒的整气,一些小排气都排放在车间内部,而且是直接排放到空间,导致整个车间的湿度比较大;

    4、当时车间设计时不合理,导致大罐一楼蛇管循环水排放直接到地面,导致地面长期有大量积水,有时地板都有长霉;

    5、化验室人员没有培训到位,取样直接排放,没有经过废液桶就直接排放到取样槽内;还有化验人员对于测定OD值的稀释液直接到如下水道;

    6、值班室人员也同样没有培训到位,对于泡沫的处理有时导致逃液;

    7、刚开始感染噬菌体的时候,没有引起足够的重视,没有采取相应的措施;

    个人认为对于噬菌体的防止首先重要的是周遍的卫生环境,以及车间的人员管理,要严格按照GMP执行。希望大家都来进行讨论针对噬菌体的处理方法。

    噬菌体爆发后应采取的措施:

    停产,用次氯酸钠将房间整个清洁消毒,所有器具高温灭菌或用次氯酸钠浸泡。

    地面用量:有效氯浓度2500ppm,大于30min;器具:有效氯浓度500ppm,20min。摇床用甲醛加高锰酸钾熏蒸,用前再用紫外照射半小时;发酵罐高温灭菌。

    如果空气中噬菌体浓度也较高的话,可以用甲醛熏蒸,3g/平米;或用紫外照射,但要注意,因为这两种方法都可能对仪器造成腐蚀。下水也要用次氯酸钠处理。空气中噬菌体的检测:双层平板法,下层是生产菌或敏感菌的培养基,上层是营养肉汤软琼脂,双层琼脂板开盖放30min,30度培养过夜。看有无噬菌斑。

    如果还不行,只好停产。或者换一个菌种,因为噬菌体有很好的特异性。而最根本的是要制定验室安全规范,杜绝活菌的散布。

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    发表于 2012-7-2 15:40:04 | 显示全部楼层
    系统的交叉污染防治也很重要

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    lwdfjw + 3 很给力!

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  • TA的每日心情

    2018-5-29 00:00
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    [LV.1]初来乍到

    发表于 2012-10-9 16:20:52 | 显示全部楼层
    很少见到噬菌体爆发染菌了,因为这种菌很脆弱,50多度就能给灭掉,我常见的染菌是芽孢杆菌,这个就比较头疼了。注意好环境和灭菌,一半不会出现那么大问题。

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    该用户从未签到

    发表于 2013-1-20 23:17:43 | 显示全部楼层
    谢谢楼主分享 学习了
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  • TA的每日心情

    2017-11-2 17:09
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    [LV.1]初来乍到

    发表于 2013-3-18 17:00:27 | 显示全部楼层
    好帖子,值得推荐!
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  • TA的每日心情

    2018-5-24 07:56
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    [LV.5]常住居民I

    发表于 2013-4-16 09:46:15 | 显示全部楼层
    環境汙染問題的處理,不能著急。每種處理方法之間最好要有間隔。

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    发表于 2013-5-15 22:29:06 | 显示全部楼层
    感谢分享学习
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    发表于 2014-2-16 13:50:14 | 显示全部楼层

    好帖子,值得推荐!
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    发表于 2016-4-26 15:44:22 | 显示全部楼层
    谢谢楼主分享
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  • TA的每日心情

    2019-12-23 14:37
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    [LV.4]偶尔看看III

    发表于 2017-9-8 08:47:02 | 显示全部楼层
    还是多做点操作规范
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