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[分享] 核酸、蛋白技术参数资料、分子量标准

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  • TA的每日心情

    2020-6-29 17:24
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    [LV.4]偶尔看看III

    发表于 2012-6-29 13:05:34 | 显示全部楼层 |阅读模式
    M-100系列生物传感分析仪快速、精确测定葡萄糖
    核酸及蛋白质常用数据

    1.核苷三磷酸的物理常数

    化合物
    分子量
    λmax(pH7.0)
    1摩尔溶液(pH7.0)中λmax时的最大吸收值
    OD280/OD260

    ATP
    507
    259
    15400
    0.15

    CTP
    483
    271
    9000
    0.97

    GTP
    523
    253
    13700
    0.66

    UTP
    484
    262
    10000
    0.38

    dATP
    494
    259
    15200
    0.15

    dCTP
    467
    271
    9300
    0.98

    dGTP
    507
    253
    13700
    0.66

    dTTP
    482
    267
    9600
    0.71



    2.常用核酸的长度与分子量

    核酸
    核苷酸数
    分子量

    λDNA
    48502(双链环状)
    3.0×107

    pBR322
    4363(双链) 2.8×106

    28SrRNA
    4800 1.6×106

    23SrRNA
    3700 1.2×106

    18SrRNA
    1900 6.1×105

    19SrRNA
    1700 5.5×105

    5SrRNA
    120 3.6×104

    tRNA(大肠杆菌)
    75 2.5×104



    3.常用核酸蛋白换算数据

      (1)重量换算

      1μg=10-6g      1pg=10-12g

      1ng=10-9g      1fg=10-15g

      (2)分光光度换算:

      1A260双链DNA=50μg/ml

      1A260单链DNA=30μg/ml

      1A260单链RNA=40μg/ml

      (3)DNA摩尔换算:

      1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端

      1μg pBR322 DNA=0.36pmol

      1pmol 1000bp DNA=0.66μg

      1pmol pBR322=2.8μg

      1kb双链DNA(钠盐)=6.6×105道尔顿

      1kb单链DNA(钠盐)=3.3×105道尔顿

      1kb单链RNA(钠盐)=3.4×105道尔顿

      (4)蛋白摩尔换算:

      100pmol分子量100,000蛋白质=10μg

      100pmol分子量50,000蛋白质=5μg

      100pmol分子量10,000蛋白质=1μg

      氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿

      (5)蛋白质/DNA换算:

      1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质

      10,000MW蛋白质=270bp DNA

      30,000MW蛋白质=810bp DNA

      50,000MW蛋白质=1.35kb

      100,000MW蛋白质=2.7kb DNA
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    [LV.4]偶尔看看III

     楼主| 发表于 2012-6-29 13:06:14 | 显示全部楼层
    4.常用蛋白质分子量标准参照物

    (1)高分子量标准参照 (2)中分子量标准参照 (3)低分子量标准参照
    肌球蛋白 分子量 磷酸化酶B 97,400 碳酸酐酶 31,00
    肌球蛋白 212,000 牛血清白蛋白 66,200 大豆脻蛋白酶 21,500
    β-半乳糖甘酶B 116,000 谷氨酶脱氢酶 55,000 抑制剂   
    磷酸化酶B 97,400 卵白蛋白 42,700 马心肌球蛋白 16,900
    牛血清白蛋白 66,200 醛缩酶 40,000 溶菌酶 14,400
    过氧化氢酶` 57,000 碳酸酐酶 31,000 肌球蛋白(F1) 8,100
    醛缩酶 40,000 大豆脻蛋白酶 21,500 肌球蛋白(F2) 6,200
        抑制剂   肌球蛋白(F3) 2,500
        溶菌酶 14,400     


    5.常用DNA分子量标准参照物

    λDNA/HindⅢ
    λDNA/EcoRⅠ
    λ/HindⅢ+EcoRⅠ
    pBR322/HaeⅢ

    23130
    21226
    21227
    587
    123

    9416
    7421
    5148
    405
    104

    6557
    5804
    4973
    504
    89

    4361
    5643
    4268
    458
    80

    2322
    4843
    3530
    434
    64

    2027
    3530
    2027
    267
    57

    564
       1904
    234
    51

    125
       1584
    213
    21

        1375
    192
    18

        974
    184
    11

        831
    124
    7

        564
         
        125
         


    常用抗生素溶液
    抗生素
    贮存液a
    工作浓度

    浓度
    保存条件
    严紧型质粒
    松弛型质粒

    氨苄青霉素 50mg/ml(溶于水) -20℃
    20μg/ml
    60μg/ml

    羧苄青霉素 50mg/ml(溶于水) -20℃
    20μg/ml
    60μg/ml

    氯霉素 34mg/ml(溶于乙醇) -20℃
    25μg/ml
    170μg/ml

    卡那霉素 10mg/ml(溶于水) -20℃
    10μg/ml
    50μg/ml

    链霉素 10mg/ml(溶于水) -20℃
    10μg/ml
    50μg/ml

    四环素b 5mg/ml(溶于乙醇) -20℃
    10μg/ml
    50μg/ml



      a:以水为溶剂的抗生素贮存液通过0.22μm滤器过滤除菌。以乙醇为溶剂的抗生素溶液无须除菌处理。所有抗生素溶液均应放于不透光的容器保存。

      b:镁离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基(如LB培养基)。
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    发表于 2012-7-5 11:15:00 | 显示全部楼层
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