为什么会出现两个生长对数期

dgmaigen

我们在做大肠杆菌发酵，在50升的发酵罐中做发酵， 大约在3-6个小时，细菌经历一个生长对数期，OD值可以达到8， 然后接着培养无太大的变化，但是到24个小时以后突然迅速生长，OD值可以达到30， 我检测了目的蛋白的表达量并没有随着OD 值由8升高30 而升高，请问是什么问题？另一个问题，尽管我不断补料，但是为啥OD值仅仅达到8， 为啥俺的产量这么低， 有没有达人可以提供一些建议或者一些好的培养基配方？ 感激不尽！ 焦急等待中---------

wuyexu1205

8太低了吧，一般大肠发酵至少可以到7、80，你用的什么菌种和培养基哦

gl19860312

按照现象看 应该是 大肠杆菌的二次生长状况

不知道 你们是分批发酵？？还是连续发酵？、 亦或是 补料分批发酵啊？？

gl19860312

蛋白表达一般是要等到 细胞生长到一定的程度以后 才开始产蛋白

就像是 产物表达与细胞生长 是半偶联型的 或者是非偶联的

很少是 偶联型的

fuxianhua111

按你说的有可能是你们的抗生素失效后出现的情况

dgmaigen

回复 2# wuyexu1205


    我们用的是LB培养基，另外在发酵时添加了氨水和氮源， 请问你用的什么培养基吸光值能达到7，80， 盼望你的指点，感激不尽， 谢谢

dgmaigen

回复 4# gl19860312


    谢谢您的答复，我的这个蛋白是个融合蛋白，表达在包涵体里，我正苦恼怎么能够将他提高产量呢， 先子没招了

fuxianhua111

回复 6# dgmaigen


    看和你们认识的分上告诉你，LB培养基培养最多能达到20G/L菌体，你可以LB+M9配方可以达到30-40g/l,按这个思路去做可以的，我的是复合培养基。最高可以达到250g/l具体是什么我不能告诉你，我以前给个你们培养基，你们实验效果还不错。工艺我也简单的告诉过你们。

fuxianhua111

按你说的有可能是你们的抗生素失效后出现的情况（指安卞抗生素不稳定长时间的会降解掉，所以你说的这个情况我估计是不是这个情况）

cheneywho

先换个培养基培养试试