菌体下罐后，在空气中，几分钟就自己裂解了

sczl1379

论坛sczl1379：
请教一下各位老师，菌体下罐后，在空气中，几分钟就自己裂解了，是怎么回事儿？

求真VS务实

论坛求真VS务实：
1、杂菌污染.这种情况一般可能性最大,可能在你前面的步骤中引入杂菌,后面扩大培养时杂菌达到一定数量,耗氧和耗养增加.解决办法：用具杀菌.
2、发酵罐条件设置不适合.这种情况比较常出现在新手中,查看你的各条件设置,查看发酵罐使用过程中各条件变化.
3、噬菌体污染.这是一种非常恶心的一种状况,到不是说难解决,高温下就可以,但是噬菌体污染源一定要找到,不然这种情况会时有发生.
4、毒性蛋白表达.这种情况很少出现,就是你转化进去的质粒有毒性蛋白的表达,这样就会出现不能大量培养,长到一定程度就会自溶.
5、还有一种很无奈的状况,大肠杆菌培养到一定程度就会有一些会自然衰老死亡（可能是连续扩培时培养基没有彻底更换导致）,这些死亡的菌体裂解释放出裂解酶,致使越来越多菌体被溶解,释放出更多裂解酶,恶性循环下,菌体绝大部分死亡.
当然,肯定还有其他可能,我只能提供些参考,还需要你自己做一些测试.如果你们解决了问题,希望能告诉我一下,

sczl1379

论坛sczl1379
关键是，我的菌在罐子里面是没问题的，取样镜检 ，形态也是正常的。
但就是在下罐后，几分钟的时间，就裂解了。还没来得及离心。

yxylmr

论坛yxylmr：
你怎么知道菌体裂解了

sczl1379

论坛sczl1379
因为发酵液突然变得很粘稠，类似于很浓很浓的鼻涕那种粘稠，然后离心，取上清去跑电泳，我们的目标蛋白条带出来了，而且条带还比较宽。
我的目标蛋白本来是在细胞内的，但是现在已经出现在了发酵液中。

liuyi6169

算常见，需要彻底解决！

shine372

在摇瓶上发酵时都没有出现过这些问题么？

史耐尔

有可能发酵液盐浓度太低