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[检测方法] 怎样表示各种酶活力?有哪些规定?白酒酿造应如何表示曲子的糖化力?

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    [LV.Master]伴坛终老

    发表于 2008-8-3 12:20:04 | 显示全部楼层 |阅读模式
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    表示酶活力大小与酶量多少的单位,称为酵活力单位。在实际应用中,各科研和生产单位,通常采用各自认为简便的方法来表示,致使不同工厂的酶制剂或麸曲的酶活力大小无法比较。通常是在最适条件下测定酶活力:

    (一)在测定单位时间内,以被酶作用的底物减少量,或产物的生成量,来表示酶活力的大小。如糖化酶,以淀粉水解后还原糖的生成量,来确定酶活力的单位和大小。

    (二)测定酶催化一定量的底物的减少,或一定量产物的生成所需的时间。例如,液化酶的活力,是使一定量的底物(淀粉)减少,淀粉与碘液不再呈蓝色为止。所需时间,与酶活力大小成反比。

    国际生化协会酶类委员会于1961年建议规定,在一定条件下,一分钟内能转化一个微克分子的底物的酶量,定义为一个酶单位,或称为酶的国际单位。在实际生产中,常以克酶或克曲所含的活力单位来表示。为了统一标准,轻工业部1977年3月所发《征求酶制剂生产标准意见的函》规定:淀粉糖化酶的活力单位为一克酶(克酶制剂、克曲)或一毫升酶液,在50℃,pH值4.8的条件下,一小时分解可溶性淀粉,产一毫克葡萄糖的酶量,为一个糖化酶活力单位。淀粉液化酶的活力单位为一克酶制剂或一毫升酶液,在60℃,pH值6.0的条件下,一小时液化可溶性淀粉的克数。蛋白酶的活力单位为一克酶或一毫升酶液在 40℃,一定的pH条件下,一分钟水解酪蛋白,产生一微克(r)的酪氨酸的酶量。

    白酒厂在实际测定麸曲糖化力时,常以一克曲,在30℃、pH值4.6的条件下,作用一定量的2%肋可溶性淀粉,每小时生成的葡萄糖毫克数,表示糖化力的单位。另外,还有以30℃单位表示糖化力者,即一克曲,30℃,每小时作用2%的可溶性淀粉,所生成的麦芽糖的毫克数来表示。还有少数白酒厂,用林脱纳(Lintner氏)值表示糖化力,即糖化一定量的淀粉,所需的糖化酶量,其结果是糖化力越大,林氏值越小。白酒厂常以发酵力作为测定酵母强弱的指标,以二氧化碳减轻量,生成酒精量等各项指标,综合观察酵母的强壮与否。发酵力是指在一定糖浓度下,参加发酵的糖份与发酵前的总糖份之百分率。所谓外观发酵力和真正发酵力按下式表示:

    外观发酵力=(发酵前糖锤度-发酵后糖锤度)×100%/发酵前糖锤度

    真正发酵力=(发酵前化验糖分-发酵后化验糖分)×100%/发酵前化验糖分
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    [LV.Master]伴坛终老

     楼主| 发表于 2008-8-3 12:20:51 | 显示全部楼层
    目前,白酒厂和酒精厂测定麸曲糖化力的方法,是在一定条件下,糖化可溶性淀粉十五分钟,乃至半小时,根据这个测定值,再推算一小时的糖化力。用这种方法测定的糖化力,只能代表麸曲的前期糖化能力,而不能确实表示麸曲的全部糖化能力。根据我们的测定,任何麸曲糖化的全过程,都不是直线的线性关系,用十五分钟的测定数据来推断麸曲糖化的全过程是不适宜的。图1是山西省祁县酒厂测定各种麸曲糖化力的全过程,曲线如下:



    图1. 3.4309、东酒1号、黄曲的糖化曲线对比

    (1) 3·4309糖化曲PH测定

    (2) 3·4309糖化曲PH2.8测定

    (3) 东酒1号糖化曲PH4.5测定

    (4) 东酒1号糖化曲PH2.5测定

    (5) 黄曲霉糖化曲PH4.5测定

    (6) 黄曲霉糖化曲PH3.3测定

    为说明上述结果,我们试图应用“前糖化力”、“后糖化力”、“总糖化力”、“非直线的线性关系”来加以说明和解释,但仍有些同志认为,这种“创造” 不能被普遍承认。然而,这是酿酒生产的客观存在。从图1实际表明,尽管十五分钟测定,黄曲霉的糖化力虽然达到2000以上,但其总糖化力远不如东酒1号和 3.4309糖化曲。由此可以得出结论,3·4309糖化曲的总糖化力大于东酒1号;东酒1号糖化曲的总糖化力大于黄曲霉。所以用3.4309糖化曲酿酒出酒率最高。图1同样表明了各种糖化曲的糖化酶的耐酸性质,因为黄曲霉的糖化酶不耐酸,在PH值2.8时,糖化酶的作用几乎完全被抑制,因此,用pH值 3.3来测定。而东酒1号糖化曲,虽然前糖化力缓慢,但后糖化力持久。在酿酒中也证明,以黄曲霉为糖化剂的酒醅,酸度一旦超过0.8,则出酒率迅速下降。而用东酒1号糖化曲的酒醅,在炎热的夏季,即使入池酒醅酸度上升至1.0,仍能保持正常的出酒率,体现了糖化酶耐酸的优越性。因此,从糖化酶的耐酸性来看,东酒1号糖化菌具有这个特点。即使3.4309糖化曲耐酸,在酿酒生产中,如果入池酸度超过0.8—0.9,出酒率也会下降。通常3.4309入池酸度稳定在0.5—0.6,出酒率可保持正常。因此,在热季酿酒时,酒醅酸度升高,东酒1号糖化菌仍不失为一个优良菌种。在白酒酿造上,如何正确表示和判断麸曲的糖化力,要从糖化酶的耐酸性,作用持久性等各方面来比较,才能正确地反映麸曲糖化力的实质,否则被一些表面现象所掩盖,容易导致错误的结论。

    为了从实践中验证,在白酒生产中,应当注重麸曲的前前化力、后糖化力和总糖化力等概念,进而证明这些概念是客观存在的,下面引用酒醅的残余糖份,来说明酒醅糖化发酵的全过程。酒醅中的残余糖份,是指糖化酶对淀粉的分解,和酵母对可发酵性糖的利用,其中包括被杂菌利用的糖,这是一个综合指标。对同一糖化或发酵菌种而言,酒醅中残糖越低,说明发酵越彻底;对不同的糖化或发酵菌种而言,酒醅发酵的残糖越高,说明提供酵母可发酵性糖份越多,越是好曲。山西省新绎酒厂测定不同糖化曲的发酵酒醅残余糖份曲线如图2:



    图2.发酵洒酷的残余糖份曲线

    从图2看出,3.4309糖化曲,在酒醅发酵过程中的残余糖份,大于东酒1号,更大于黄曲霉。也就是说,3.4309的总糖化力和前糖化力均高于东酒1号和黄曲霉,而东酒1号的后糖化力则高于3·4309糖化曲。这就证明了白酒生产中糖化酶的前糖化力、后糖化力、总糖化力等,都是客观存在的。

    下面是山西省新绛酒厂以3.4309、东酒1号、黄曲霉分别为糖化曲,以Rasse12号酵母为发酵剂,以高梁面加水1∶4制成糊化醪,加酒母5%,不同用曲量发酵72小时,所表明的结果如表3:

    表3 不同糖化曲发酵力的测定

    | CO2生成量(克) |
    菌种 用曲量% 24小时 48小时 72小时 总计 72小时生成酒精浓度%

      3 3.7 4.0 0.9 8.6 5.0
    3·4309 5 4.3 4.0 0.8 9.1 5.2
      7 4.6 3.8 0.5 8.9 5.2
      7 4.0 3.0 0.7 7.7 4.3
    东酒一号 10 4.3 2.8 0.7 7.8 4.8
      13 4.6 2.4 0.5 7.5 4.6
    黄曲(3800) 8 4.4 2.2 0.3 7.1 4.1


    由此得出一个结论,即麸曲的糖化力,不能以十五分钟测定的数据为根据,而应以总糖化力为根据,才能正确反映出糖化酶的酿酒性能。即总糖化力越高,出酒率也越高。前糖化力很高,后糖化力不高,出酒率也不会很高,菌种的酿酒性能也未必很好。
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