动物细胞培养稳定性方面大家有什么见解?

lwangd8

难得胡涂(274023692) 19:27:26
动物细胞培养稳定性方面大家有什么见解！
CHO-悬浮(273166664) 19:31:38
哪方面的稳定性？表达产物的稳定性么？
CHO-悬浮(273166664) 19:31:43
还是其他？
难得胡涂(274023692) 19:32:00
对啊
难得胡涂(274023692) 19:32:48
就是在培养规模放大时细胞密度，产物表达。。。
CHO-悬浮(273166664) 19:33:44
我想这个还是要看你表达的东西容不容易丢失
CHO-悬浮(273166664) 19:34:16
有的不易丢失的 相同的培养方式 过程还是稳定的
难得胡涂(274023692) 19:34:26
我觉得单细胞抗体分泌量一般变化不大，但细胞密度方面好象不怎么稳定
Kwatoko(71379345) 19:37:04
难得胡涂(274023692) 19:34:26
我觉得单细胞抗体分泌量一般变化不大，但细胞密度方面好象不怎么稳定
????????????
CHO-悬浮(273166664) 19:37:29
这个就是你培养的问题了吧？
难得胡涂(274023692) 19:39:12
比如同一批冻存的细胞，复苏后就感觉倍增有差异
CHO-悬浮(273166664) 19:39:17
一批长得快 最高密度高 一批就长得慢 最高密度低 那还得看你控制的怎么样
难得胡涂(274023692) 19:39:52
控制差异不大
CHO-悬浮(273166664) 19:40:06
复苏后差异会有的 不可能每只都一样 但是不会太大 在培养过程中可以调整呀
CHO-悬浮(273166664) 19:40:14
大家都什么看法？说说看
五百(160235453) 19:47:56
同一批冻存细胞差异肯定有，不过应该也不会太大吧
CHO-悬浮(273166664) 19:48:39
就是 不会太大
执著(8076321) 19:48:54
这种倍增的差异，没遇到过
难得胡涂(274023692) 19:49:15
哦。。。
五百(160235453) 19:49:28
基本上复苏后传过几代就稳定了
执著(8076321) 19:50:15
你复苏后的活力，接种密度有没有啥问题
CHO-悬浮(273166664) 19:52:17
控制上有没有什么过酸或者过碱的情况？
难得胡涂(274023692) 19:53:13
这种控制上的问题没有
五百(160235453) 19:53:23
复苏过程会有差异，有时候复苏操作死的细胞多些，有时候少些，开始会有差异，后面定下接种密度和条件都一致后差异应该没那么大了
CHO-悬浮(273166664) 19:54:41
你们都是怎么复苏？看看咱们复苏上有没有什么差异 我听过的复苏 就有不同的
难得胡涂(274023692) 19:55:07
从摇瓶到生物反应器问题不大，从复苏到摇瓶有点差异
难得胡涂(274023692) 19:55:34
培养基重悬啊
五百(160235453) 19:56:42
基本上这个也不是什么大问题啊，只是时间用的多少而已，基本上我是不大管这个差异，达到我要的量就可以了
CHO-悬浮(273166664) 19:57:10
我们是 先准备好培养瓶 加上培养基放在温箱里10分钟 然后37到40度 1分钟之内融化掉 直接接入培养瓶 附着后换液 不离心  
五百(160235453) 19:58:42
我是用37度的水，几秒钟化完
CHO-悬浮(273166664) 19:58:54
我们认为离心重悬 在细胞刚刚复苏阶段 对细胞伤害比较大  
难得胡涂(274023692) 19:59:12
贴壁细胞？
CHO-悬浮(273166664) 19:59:32
我们37度水化的慢
CHO-悬浮(273166664) 19:59:46
我们贴壁悬浮都有
五百(160235453) 19:59:54
都有
CHO-悬浮(273166664) 20:00:06
但是复苏时代血清复苏
五百(160235453) 20:00:12
一般都会到40度左右去了
CHO-悬浮(273166664) 20:00:42
有人说40到42度
难得胡涂(274023692) 20:00:52
五百(160235453) 19:58:42
我是用37度的水，几秒钟化完
几秒能化完？
执著(8076321) 20:01:10
我们有几分钟才能化完，
CHO-悬浮(273166664) 20:01:20
其实 40度就行 这个快 损伤小
执著(8076321) 20:01:21
也用40度的水，
五百(160235453) 20:01:28
我冻存的细胞液体积只有1ml，不知道你们冻存的是多少
CHO-悬浮(273166664) 20:01:38
1-1.5
五百(160235453) 20:01:48
差不多
执著(8076321) 20:02:05
都一样的，1ml,密度是10,你们呢
CHO-悬浮(273166664) 20:02:28
我们也是
五百(160235453) 20:03:37
我会拿着管在水浴槽里面晃
执著(8076321) 20:09:34
有在线测细胞浓度的产品，大家有了解么