DNS法测定葡萄糖怪异现象望专家帮忙解析先谢谢了

冰雪凌露

培养基为LB+5g/L葡萄糖，装有100ml培养基的250ml摇瓶，大肠杆菌表达胞内蛋白，3h后诱导，7h后收菌。
每隔1个小时测葡萄糖含量（DNS法）：
h     10*OD      20*OD     30*OD
2      1.703      1.494        0.458
3      1.554      1.246        0.421
4      1.305      1.304        0.309
5      1.234       0.955        0.28
6     1.077        0.834        0.208
7     1.04          0.753  
h   
2    4.75137    4.16826      3.83346
3    4.33566     6.95268     3.52377
4    3.64095     7.27632     2.58633
5     3.44286     5.3289      2.3436
6     3.00483     4.65372    1.74096
7     2.9016       4.20174     0
数据说明：  
第一竖排2，3，4，5，6，7表示时间   
10*OD表示发酵液稀释10倍后测OD540，  
20*OD表示发酵液稀释20倍后测OD540，
30*OD表示发酵液稀释30倍后测OD540.   

第二竖排2，3，4，5，6，7也表示时间  
数据对应于上面OD值经标准曲线计算的葡萄糖含量并乘以相应的稀释度求得到葡萄糖含量(mg/ml)。   
标准曲线方程为y=0.279x    x代表OD，y代表葡萄糖含量。R方=0.9925
问题：为什么经过不同稀释度会有这么大的差距，我该如何选取？   
望高手给予解答谢谢。
另外，我标准曲线数据（其中OD大于1的是经显色后稀释测定的数据）：  
  OD       mg
0.81      0.2
1.362     0.4
2.139     0.6
2.992     0.8
3.49       1

fuxianhua111

1R方=0.9925 应该是R方=0.995以上。
2另外这个数据是你的公式不怎么好造成的。
3还有就是你稀释也可能出现这个问题
建议从这3个方向找原因

qiupan

我也碰到过这种问题，静等高手点拨。

angle1017

按不同的量稀释一下

gl19860312

分光光度计   线性范围 0.2~~0.8之间最好

有的粗略的 0.1~~1.0 也可以